構(gòu)建小鼠慢性炎癥-黑色素瘤復(fù)合模型的研究.pdf

1、目的：
　　探索建立小鼠慢性炎癥-黑色素瘤復(fù)合模型的方法，通過(guò)觀察慢性炎癥對(duì)腫瘤體積、重量、微血管密度的影響，闡明慢性炎癥對(duì)進(jìn)展期移植腫瘤生長(zhǎng)的影響，為進(jìn)一步研究炎癥因子對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的影響打下實(shí)驗(yàn)學(xué)基礎(chǔ)。
　　內(nèi)容：
　　1.慢性炎癥模型的建立：在小鼠背部皮下注入空氣制作氣囊，向氣囊里注入致炎物質(zhì)脂多糖、卡介苗，觀察慢性炎癥模型造模效果以及炎癥由急性進(jìn)入慢性的時(shí)間段。
　　2.黑色素瘤模型的建立：75％酒精棉球消毒

2、小鼠后，在鼠蹊部皮下注入黑色素瘤細(xì)胞懸浮液。
　　3.慢性炎癥-黑色素瘤復(fù)合模型的建立：在小鼠背部皮下注入空氣制作氣囊或包埋玻璃珠后，每周向氣囊里或玻璃珠周圍注入致炎物質(zhì)。初次注入致炎物質(zhì)3天后，在鼠蹊部皮下注入黑色素瘤細(xì)胞懸浮液建立四種小鼠慢性炎癥-黑色素瘤復(fù)合模型，比較優(yōu)劣，選擇合適的慢性炎癥-黑色素瘤復(fù)合模型。
　　4.慢性炎癥對(duì)黑色素瘤體積、重量和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的影響：建立慢性炎癥-黑色素瘤復(fù)合模型，比較對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組腫瘤

3、體積、重量的變化和肺、肝、脾的轉(zhuǎn)移發(fā)生率。
　　5.慢性炎癥對(duì)微血管密度的影響：通過(guò)HE染色比較對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組微血管密度，明確內(nèi)皮依賴性血管在炎癥環(huán)境中的變化。
　　方法：
　　1.在小鼠背部皮下注入空氣制作氣囊，向氣囊里注入致炎物質(zhì)脂多糖、卡介苗，建立兩種慢性炎癥模型，觀察造模效果以及模型達(dá)到慢性炎癥狀態(tài)的時(shí)間段。
　　2.在前期實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，在小鼠上分別建立氣囊卡介苗致炎腫瘤模型(A組)，氣囊弗氏佐劑致炎腫瘤模

4、型(B組)，氣囊脂多糖致炎腫瘤模型(C組)，埋珠脂多糖致炎腫瘤模型(D組)，生理鹽水腫瘤模型為對(duì)照組(E組)。
　　3.計(jì)算各組腫瘤不同觀測(cè)時(shí)間點(diǎn)的體積，重量并進(jìn)行比較。HE染色，高倍光鏡下辨認(rèn)微血管，按Weidner法計(jì)數(shù)腫瘤組織樣本中微血管數(shù)；觀察腫瘤臟器轉(zhuǎn)移的發(fā)生率。
　　結(jié)果：
　　1.在小鼠背部皮下制作氣囊，注入脂多糖或卡介苗可以成功地建立小鼠皮下氣囊慢性炎癥模型。此模型能較好地模擬在單一致炎因子存在情況下引

5、起的慢性炎癥狀態(tài)。以脂多糖或卡介苗作為致炎物質(zhì)的氣囊炎癥模型達(dá)到慢性炎癥狀態(tài)的時(shí)間為造模后1周左右。
　　2.不同慢性炎癥-黑色素瘤復(fù)合模型的效果：在所有小鼠的肺、肝、脾中均未發(fā)現(xiàn)黑色素瘤轉(zhuǎn)移灶；A組腫瘤重量在建模后第21d差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B組腫瘤重量在建模后第15d、21d差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，體積在第21d有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。C組腫瘤和D組腫瘤和體積重量在建模后第9d、21d差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.不同慢性炎癥-黑色素瘤復(fù)合

6、模型中MVD的表現(xiàn)：A組腫瘤MVD在建模后第9d、15d、21d、27d差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。B組腫瘤MVD在建模后第9d、15d、21d、27d差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。C組腫瘤MVD在建模后第21d差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。D組腫瘤建模后第15d、21d差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　1.建立了小鼠皮下氣囊慢性炎癥模型，此模型能較好地模擬在單一致炎因子存在情況下引起的慢性炎癥狀態(tài)。
　　2.建立四種對(duì)腫瘤生長(zhǎng)有影響的動(dòng)物模型，在致