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文檔簡介
1、目的:臨床觀察發(fā)現(xiàn)阿爾茨海默病人常并發(fā)焦慮性疾病,其機制不明;另一方面,腹內(nèi)側(cè)前額葉皮質(zhì)(ventromedial prefrontal cortex,vmPFC)關(guān)鍵性參與恐懼消退調(diào)節(jié),而恐懼消退缺陷常導(dǎo)致焦慮性疾病產(chǎn)生。本研究擬通過檢測腹內(nèi)側(cè)前額葉微注射β-淀粉樣多肽對大鼠線索性與場景性條件化恐懼反應(yīng)的影響,以期探討阿爾茨海默病并發(fā)焦慮性疾病的可能機制。
方法:1、vmPFC內(nèi)微注射:大鼠麻醉后固定于立體定位儀上,用微量注
2、射器雙側(cè)vmPFC內(nèi)微注射PBS(溶媒組)、Aβ42-1(Aβ42-1組)與Aβ1-42(Aβ1-42組),注射后行縫合與消毒處理。術(shù)后第26天,行自發(fā)活動檢測。2、線索性恐懼條件化范式:行為訓(xùn)練分為五個階段即習(xí)慣化、恐懼條件化(聲刺激與足底電擊配對訓(xùn)練)、消退訓(xùn)練(僅呈現(xiàn)聲刺激)、消退檢測(僅呈現(xiàn)聲刺激)及重建(2次電擊后僅呈現(xiàn)聲刺激),每兩個相鄰的訓(xùn)練階段之間相隔24小時。習(xí)慣化訓(xùn)練于術(shù)后第27天開始;重建后24小時行足底電擊敏感性
3、檢測。條件化恐懼反應(yīng)檢測指標為聲刺激誘發(fā)的大鼠僵直時間百分比;在恐懼條件化階段,同時檢測聲刺激與場景誘發(fā)的非特異性僵直反應(yīng)。最后將大鼠灌流取腦,切片染色。3、場景性恐懼條件化范式:除條件化刺激為場景外,其它所有實驗程序同線索性恐懼條件化范式。條件化恐懼反應(yīng)檢測指標為場景誘發(fā)的大鼠僵直時間百分比。
結(jié)果:1、vmPFC的IL區(qū)HE染色顯微照片顯示:溶媒組與Aβ42-1組神經(jīng)元完整未受損,排列整齊;Aβ1-42組注射針道附近神經(jīng)膠
4、質(zhì)細胞聚集與神經(jīng)元丟失。2、線索性恐懼條件化范式:在恐懼條件化、消退訓(xùn)練及重建階段,溶媒組、Aβ42-1組與Aβ1-42組大鼠僵直時間百分比均無顯著性組間差異;在消退檢測階段, Aβ1-42組大鼠僵直時間百分比顯著高于溶媒組與Aβ42-1組大鼠。3、場景性恐懼條件化范式:在恐懼條件化、消退訓(xùn)練及重建階段,溶媒組、Aβ42-1組與Aβ1-42組大鼠僵直時間百分比均無顯著性組間差異;在消退檢測階段, Aβ1-42組大鼠僵直時間百分比顯著高于
5、溶媒組與Aβ42-1組大鼠。4、自發(fā)活動:溶媒組、Aβ42-1組與Aβ1-42組大鼠自發(fā)活動水平無顯著性組間差異。5、足底電擊敏感性:溶媒組、Aβ42-1組與Aβ1-42組大鼠足底電擊敏感性無顯著性組間差異。6、對聲音和場景的非特異性僵直反應(yīng):溶媒組、Aβ42-1組與 Aβ1-42組大鼠對聲音與場景誘發(fā)的非特異性僵直反應(yīng)均無顯著性組間差異。
結(jié)論:大鼠vmPFC內(nèi)微注射Aβ1-42損傷大鼠線索性與場景性長時程恐懼消退記憶,但對
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