腹內(nèi)側(cè)前額葉微注射β-淀粉樣多肽對(duì)大鼠條件化恐懼反應(yīng)的影響.pdf

1、目的:臨床觀察發(fā)現(xiàn)阿爾茨海默病人常并發(fā)焦慮性疾病,其機(jī)制不明;另一方面,腹內(nèi)側(cè)前額葉皮質(zhì)(ventromedial prefrontal cortex,vmPFC)關(guān)鍵性參與恐懼消退調(diào)節(jié),而恐懼消退缺陷常導(dǎo)致焦慮性疾病產(chǎn)生。本研究擬通過(guò)檢測(cè)腹內(nèi)側(cè)前額葉微注射β-淀粉樣多肽對(duì)大鼠線索性與場(chǎng)景性條件化恐懼反應(yīng)的影響,以期探討阿爾茨海默病并發(fā)焦慮性疾病的可能機(jī)制。
　　方法:1、vmPFC內(nèi)微注射:大鼠麻醉后固定于立體定位儀上,用微量注

2、射器雙側(cè)vmPFC內(nèi)微注射PBS(溶媒組)、Aβ42-1(Aβ42-1組)與Aβ1-42(Aβ1-42組),注射后行縫合與消毒處理。術(shù)后第26天,行自發(fā)活動(dòng)檢測(cè)。2、線索性恐懼條件化范式:行為訓(xùn)練分為五個(gè)階段即習(xí)慣化、恐懼條件化(聲刺激與足底電擊配對(duì)訓(xùn)練)、消退訓(xùn)練(僅呈現(xiàn)聲刺激)、消退檢測(cè)(僅呈現(xiàn)聲刺激)及重建(2次電擊后僅呈現(xiàn)聲刺激),每?jī)蓚€(gè)相鄰的訓(xùn)練階段之間相隔24小時(shí)。習(xí)慣化訓(xùn)練于術(shù)后第27天開始;重建后24小時(shí)行足底電擊敏感性

3、檢測(cè)。條件化恐懼反應(yīng)檢測(cè)指標(biāo)為聲刺激誘發(fā)的大鼠僵直時(shí)間百分比;在恐懼條件化階段,同時(shí)檢測(cè)聲刺激與場(chǎng)景誘發(fā)的非特異性僵直反應(yīng)。最后將大鼠灌流取腦,切片染色。3、場(chǎng)景性恐懼條件化范式:除條件化刺激為場(chǎng)景外,其它所有實(shí)驗(yàn)程序同線索性恐懼條件化范式。條件化恐懼反應(yīng)檢測(cè)指標(biāo)為場(chǎng)景誘發(fā)的大鼠僵直時(shí)間百分比。
　　結(jié)果:1、vmPFC的IL區(qū)HE染色顯微照片顯示:溶媒組與Aβ42-1組神經(jīng)元完整未受損,排列整齊;Aβ1-42組注射針道附近神經(jīng)膠

4、質(zhì)細(xì)胞聚集與神經(jīng)元丟失。2、線索性恐懼條件化范式:在恐懼條件化、消退訓(xùn)練及重建階段,溶媒組、Aβ42-1組與Aβ1-42組大鼠僵直時(shí)間百分比均無(wú)顯著性組間差異;在消退檢測(cè)階段, Aβ1-42組大鼠僵直時(shí)間百分比顯著高于溶媒組與Aβ42-1組大鼠。3、場(chǎng)景性恐懼條件化范式:在恐懼條件化、消退訓(xùn)練及重建階段,溶媒組、Aβ42-1組與Aβ1-42組大鼠僵直時(shí)間百分比均無(wú)顯著性組間差異;在消退檢測(cè)階段, Aβ1-42組大鼠僵直時(shí)間百分比顯著高于

5、溶媒組與Aβ42-1組大鼠。4、自發(fā)活動(dòng):溶媒組、Aβ42-1組與Aβ1-42組大鼠自發(fā)活動(dòng)水平無(wú)顯著性組間差異。5、足底電擊敏感性:溶媒組、Aβ42-1組與Aβ1-42組大鼠足底電擊敏感性無(wú)顯著性組間差異。6、對(duì)聲音和場(chǎng)景的非特異性僵直反應(yīng):溶媒組、Aβ42-1組與 Aβ1-42組大鼠對(duì)聲音與場(chǎng)景誘發(fā)的非特異性僵直反應(yīng)均無(wú)顯著性組間差異。
　　結(jié)論:大鼠vmPFC內(nèi)微注射Aβ1-42損傷大鼠線索性與場(chǎng)景性長(zhǎng)時(shí)程恐懼消退記憶,但對(duì)