膠質(zhì)瘤中EGFR過表達(dá)及其基因擴(kuò)增狀態(tài)與臨床病理相關(guān)性研究.pdf

1、背景：
　　 膠質(zhì)瘤是成人中樞神經(jīng)系統(tǒng)最為常見的原發(fā)性腫瘤，盡管目前采用包括手術(shù)切除，放射治療和化學(xué)治療在內(nèi)的綜合治療策略，但是，高級(jí)別神經(jīng)膠質(zhì)瘤的預(yù)后仍不盡人意，特別是多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，由于癌組織常侵襲周圍正常腦組織，且術(shù)后易復(fù)發(fā)，患者存活期短，多形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤病人的平均中位生存期大約只有一年，在過去的十年中沒有顯著改善，現(xiàn)有治療手段均不能顯著改善該類患者的預(yù)后，因此，迫切需要開發(fā)新的治療策略或新的輔助治療方法。
　　

2、 近年來，隨著腫瘤分子生物學(xué)的發(fā)展，分子靶向治療讓癌癥病人看到了新曙光，漸成為抗腫瘤治療的重要組成部分，并已在各類腫瘤的治療中取得了重大進(jìn)展，而EGFR成為目前分子靶向治療的研究熱點(diǎn)。EGFR(epidermalgrowthfactorreceptor)是一種相對(duì)分子質(zhì)量為170KD的跨膜蛋白受體，是c-erbB酪氨酸激酶受體蛋白家族成員之一。EGFR通過與配體的連接而被激活，常見配體有EGF和轉(zhuǎn)錄生長因子-a(TGF-a)，引起同源

3、或異源二聚化，隨后引起自身磷酸化而激活下游信號(hào)通路。研究發(fā)現(xiàn)，40～50％的膠質(zhì)瘤細(xì)胞存在表皮生長因子受體(EGFR)異常表達(dá)，并且常伴隨基因擴(kuò)增及突變，其中最常見的突變形式是表皮生長因子受體突變體Ⅲ(EGFRvⅢ)。EGFRvⅢ尚未在正常組織中檢出，故被視為惡性腫瘤特異性表達(dá)的EGFR突變體，為腫瘤的靶向治療提供了新的思路。
　　 本實(shí)驗(yàn)旨在采用免疫組織化學(xué)法研究EGFR和EGFRvⅢ在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及用熒光原位雜交法研究EG

4、FR基因擴(kuò)增，研究各指標(biāo)之間的相關(guān)性，探討其與膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展之間的關(guān)系及其與各臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系，以期為膠質(zhì)瘤患者的個(gè)體化綜合治療方案、預(yù)后評(píng)價(jià)及分子靶向治療提供有力的理論依據(jù)。
　　 目的：
　　 探討EGFR蛋白過表達(dá)和基因擴(kuò)增在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的作用及兩者的相關(guān)性，突變體EGFRvⅢ蛋白表達(dá)水平以及他們與臨床病理參數(shù)的相關(guān)性，分析膠質(zhì)瘤病人的生存及影響病人預(yù)后生存的因素，并研究不同年齡分組中膠質(zhì)瘤病人EGF

5、R的狀態(tài)及與生存的相關(guān)性，為膠質(zhì)瘤患者的EGFR靶向治療及多靶點(diǎn)聯(lián)合治療的提供依據(jù)。
　　 方法：
　　 采用IHC分析158例膠質(zhì)瘤(其中Ⅰ級(jí)14例，Ⅱ級(jí)32例，Ⅲ級(jí)27例，Ⅳ級(jí)85例)和20例正常腦組織中EGFR和EGFRvⅢ的蛋白表達(dá)情況；采用FISH分析EGFR基因狀態(tài)。
　　 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析用SPSS16.0軟件完成，計(jì)數(shù)資料用pearson卡方檢驗(yàn)，患者預(yù)后分析采用COX比例風(fēng)險(xiǎn)模型單因素和多因素分析，生

6、存率曲線采用Kaplan-Meier法繪制，組間差異采用Log-rank檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 在20例正常腦組織，14例Ⅰ級(jí)星形細(xì)胞膠質(zhì)瘤，32例Ⅱ級(jí)星形細(xì)胞膠質(zhì)瘤，27例Ⅲ級(jí)間變型星形細(xì)胞瘤和85例Ⅳ級(jí)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中EGFR蛋白的過表達(dá)率分別是0％(20/20)，7.1％(1/14)，50.0％(16/32)，62.9％(17/27)和80.0％(68/85)。EGFR蛋白在正常腦

7、組織和不同級(jí)別的膠質(zhì)瘤中的表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在102例(64.6％)EGFR過表達(dá)的病例中，3+者有55例(53.9％)，2+者有47例(46.1％)。EGFR過表達(dá)與腫瘤級(jí)別、KPS評(píng)分有關(guān)(P<0.05)，而與其他的病理參數(shù)無關(guān)(P>0.05)。在≥60歲和<60歲的膠質(zhì)瘤病人中EGFR蛋白過表達(dá)沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　 EGFRvⅢ蛋白在20例正常腦組織，14例Ⅰ級(jí)星形細(xì)胞膠質(zhì)瘤，32例

8、Ⅱ級(jí)星形細(xì)胞膠質(zhì)瘤，27例Ⅲ級(jí)間變型星形細(xì)胞瘤和85例Ⅳ級(jí)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的表達(dá)率分別是0％(0/20)，0％(0/14)，9.4％(3/32)，22.2％(6/27)和45.2％(38/84)。EGFRvⅢ蛋白在正常腦組織和不同級(jí)別的膠質(zhì)瘤中的表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。EGFRvⅢ蛋白表達(dá)與腫瘤級(jí)別、性別、年齡、KPS評(píng)分有關(guān)(P<0.05)，而與與其他的病理參數(shù)無關(guān)(P>0.05)。在≥60歲的膠質(zhì)瘤病人EGFRvⅢ蛋白

9、表達(dá)較<60歲的膠質(zhì)瘤病人更常見(P<0.05)。
　　 在20例正常腦組織，14例Ⅰ級(jí)星形細(xì)胞膠質(zhì)瘤，32例Ⅱ級(jí)星形細(xì)胞膠質(zhì)瘤，27例Ⅲ級(jí)間變型星形細(xì)胞瘤和85例Ⅳ級(jí)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤EGFR擴(kuò)增率分別為0％(0/20)，0％(0/14)，3.1％(1/32)，22.2％(6/27)和45.9％(39/85)。EGFR擴(kuò)增共46例(29.1％)，其中有44例(95.7％)伴有EGFR蛋白的過表達(dá)，3+者27例(61.4％)，2+者1

10、7例(38.6％)。EGFR擴(kuò)增在高級(jí)別和低級(jí)別膠質(zhì)瘤之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。EGFR基因擴(kuò)增與腫瘤分級(jí)，年齡和KPS評(píng)分有關(guān)(P<0.05)，而與其他的病理參數(shù)無關(guān)(P>0.05)。在≥60歲的膠質(zhì)瘤病人中EGFR基因擴(kuò)增明顯高于<60歲的膠質(zhì)瘤病人(P<0.05)。EGFR基因狀態(tài)與EGFR蛋白過表達(dá)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性(P<0.05)。
　　 Kaplan-Meier生存分析顯示不同級(jí)別膠質(zhì)瘤的生存時(shí)間分別是

11、96.3、84.9、13.5、12.3(單位：月)，Log-Rank檢驗(yàn)P<0.05。高級(jí)別和低級(jí)別膠質(zhì)瘤的中位生存時(shí)間分別是86.4和12.5月(P<0.05)，單因素生存分析顯示腫瘤分級(jí)、病人年齡、EGFR過表達(dá)、EGFRvⅢ表達(dá)、EGFR基因擴(kuò)增、KPS評(píng)分、腫瘤大小、術(shù)后放療和切除范圍與病人的生存有關(guān)(均P<0.05)，而其他的病理指標(biāo)如病人性別和腫瘤部位與生存無關(guān)(P>0.05)。COX多因素分析顯示腫瘤分級(jí)(P<0.05)、

12、KPS評(píng)分(P<0.05)、病人年齡(P<0.05)和EGFR基因擴(kuò)增(P<0.05)是膠質(zhì)瘤病人預(yù)后的獨(dú)立影響因素。Kaplan-Meier生存分析顯示EGFR擴(kuò)增者中位生存時(shí)間明顯的長于EGFR非擴(kuò)增者(45.8和11.9月，P<0.05)。在年齡≥60歲的病例中，WHO分級(jí)(P<0.05)，KPS評(píng)分(P<0.05)andEGFRvⅢ(P<0.05)是其預(yù)后的獨(dú)立影響因素。
　　 結(jié)論：
　　 1，EGFR蛋白表達(dá)