蛋白質(zhì)組學在胰腺假乳頭狀實體瘤標志物中的初步研究.pdf

1、目的：胰腺假乳頭狀實體瘤（SPT）為一種低度惡性腫瘤。目前對于SPT疾病的發(fā)生，組織來源等仍所知甚少，亦缺乏特異性的SPT相關(guān)腫瘤標志物。使用等重同位素多標簽相對或絕對定量蛋白質(zhì)組學（iTRAQ）方法，針對腫瘤蛋白質(zhì)進行同位素相對定量蛋白質(zhì)組學分析，了解SPT組織與正常胰腺組織之間的差異表達蛋白質(zhì)。探討SPT發(fā)病機制，并對其組織起源進行研究。同時尋求SPT特異性蛋白質(zhì)作為其腫瘤生物標志物。
　　方法：選取SPT手術(shù)標本共九例，每例

2、標本包括腫瘤組織及正常胰腺組織作為實驗標本，隨后將標本處理后，肽段iTRAQ標記分級、LC-MS質(zhì)譜分析、數(shù)據(jù)分析以得出蛋白質(zhì)的定量及定性結(jié)果。進一步行KEGG通路分析，分析并確定差異表達蛋白質(zhì)參與的最主要的代謝和信號轉(zhuǎn)導途徑。
　　結(jié)果：iTRAQ方法從腫瘤和對照組標本中同分析獲得差異表達蛋白質(zhì)1171種（Ratio>+/-1.5，P<0.05）。分析所得SPT組織中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白質(zhì)加工通路相關(guān)蛋白質(zhì)存在明顯差異表達，其可能與SPT

3、腫瘤形成相關(guān)，同時鑒定出上調(diào)蛋白MSI2/DKK4，以及下調(diào)蛋白EPHX2/JUP四個蛋白作為生物標志物候選蛋白。
　　結(jié)論：本次研究，建立了以iTRAQ技術(shù)及液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法作為方法，用于SPT腫瘤組織和對照正常組織的蛋白質(zhì)組分析的可靠實驗方法。首次發(fā)現(xiàn)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與SPT腫瘤形成的關(guān)系。SPT異常表達MSI2/DKK4/EPHX2和JUP四種蛋白質(zhì)，其中可能包含有能作為SPT腫瘤組織生物標志物的蛋白質(zhì)。
　　MSI2、

4、DKK4、EPHX2和JUP在胰腺假乳頭狀實體瘤中的表達及其意義
　　目的：研究Msi2、DKK4、EPHX2以及連接斑珠蛋白（junction plakoglobin，JUP）作為潛在的生物標志物對胰腺假乳頭狀實體瘤的診斷意義。
　　方法：SPT標本共23例，對照組取正常胰腺組織標本5例，制備組織芯片。對SPT及正常對照組織的免疫組化染色強度和染色面積進行評估。染色強度分別為0，1+，2+，3+，其分別代表陰性、輕度陽性、

5、中度陽性及強陽性。
　　結(jié)果：MSI2陽性表達在23例SPT腫瘤組織樣本中占91.3%（21/23），對照組陽性表達為2例（2/5），ROC曲線下面積為0.870，敏感性為82.5%，特異性為80.0%。DKK4陽性表達占91.3%（21/23），AUC為0.904，敏感性為91.3%，特異性為60.0%。EPHX2陽性表達占60.9%（14/23），JUP陽性表達占52.2%（12/23），EPHX2、JUP在正常胰腺組織中均有