豬ADD1基因的克隆及其與肉質(zhì)性狀關(guān)系的研究.pdf

1、隨著生活水平不斷改善,人們對于豬肉品質(zhì)要求越來越高.可以肯定,改良肉質(zhì)性狀將是中國未來動物育種工作中的重點.在人類的研究中,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)脂肪細(xì)胞分化和決定因子-1(ADD1)基因與脂肪外組織的脂肪沉積有著確定的連鎖關(guān)系.ADD1基因同PPAR基因、C/EBP基因共同調(diào)控脂肪細(xì)胞的分化,同時參與低密度脂蛋白(LDL)受體、乙酰輻酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)、葡萄糖激酶(GK)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)等有關(guān)脂肪合成

2、和葡萄糖代謝的基因的表達(dá).最近的研究表明,ADD1基因能夠調(diào)節(jié)非脂肪組織的脂肪沉積.有鑒于此,該研究以豬ADD1基因為豬肉質(zhì)性狀的候選基因來研究豬ADD1基因多態(tài)與肉質(zhì)性狀的相關(guān)性.具體工作極其結(jié)論如下:(1) ADD1的克隆和表達(dá):利用同源克隆的方法首次克隆豬ADD1基因的全長編碼序列和部分DNA序列.經(jīng)過同源性分析和蛋白質(zhì)三維保守性結(jié)構(gòu)分析以及southern雜交分析,結(jié)果表明:所克隆序列是豬ADD1基因.(2)ADD1的表達(dá)規(guī)律:

3、用RT-PCR的方法檢測了豬10種組織的RNA表達(dá)量.結(jié)果顯示在心、脾、肺、腎、胃、大腸、小腸、肌肉、脂肪等組織都有ADD1基因的表達(dá).在脂肪組織中表達(dá)量最高,在肌肉組織中表達(dá)量最低.為ADD1基因與肉質(zhì)性狀的連鎖的研究奠定了理論基礎(chǔ).(3)ADD1基因的SNP與肉質(zhì)性狀的相關(guān)性分析:利用PCR-SSCP方法掃描了部分DNA序列,發(fā)現(xiàn)了一個SNP.在兩個試驗組(不同的品種和營養(yǎng)因子效應(yīng))中檢測ADD1基因的不同基因型,并且根據(jù)不同的試驗

4、組構(gòu)建不同統(tǒng)計分析模型對ADD1基因的SNP與肉質(zhì)性狀進(jìn)行相關(guān)分析.結(jié)果顯示:在試驗組A(存在對肉質(zhì)有顯著影響的營養(yǎng)因子效應(yīng))中,ADD1基因AB型和BB型在肉色和肌內(nèi)脂肪上存在顯著差異(P<0.05=,并且AB型與BB型相比有較高的肌內(nèi)脂肪含量、淺的肉色.各個營養(yǎng)組間肉色、肌內(nèi)脂肪含量、蛋白質(zhì)含量、pH值等指標(biāo)差異極顯著(P<0.01).在試驗組B(存在對肉質(zhì)有顯著影響的品種效應(yīng))中,ADD1基因AA型和BB型間在肉色、肌內(nèi)脂肪和嫩度