日本血吸蟲卵對(duì)TNBS誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸炎模型調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：研究日本血吸蟲卵對(duì)2，4，6-三硝基苯磺酸(2，4，6-trinitrobenzesulfonic acid，TNBS)誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸炎模型脾臟調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells，Treg)、調(diào)節(jié)性B細(xì)胞(regulatory B cells，Breg)表達(dá)水平影響并探討其機(jī)制。
　　方法：BALB/c小鼠(n=60)隨機(jī)分成四組：正常對(duì)照組(ctrl組，n=10)、血吸蟲卵組(TNBS-OVA+組，n=10)

2、、TNBS組(TNBS+OVA-組，n=20)、TNBS+血吸蟲卵組(TNBS+OVA+組，n=20)。TNBS-OVA+組及TNBS+OVA+組小鼠在實(shí)驗(yàn)開始的第2、9天分別給予腹腔注射冰凍滅活日本血吸蟲卵15000個(gè)(1ml冰生理鹽水混懸液)，ctrl組及TNBS+OVA-組同時(shí)給予相同體積的冰生理鹽水腹腔注射。在實(shí)驗(yàn)開始第11天TNBS+OVA-組及TNBS+OVA+組小鼠予TNBS溶液3mg/只灌腸建立結(jié)腸炎模型，期間觀察四組小

3、鼠的活動(dòng)狀況。建立結(jié)腸炎模型后6天(即實(shí)驗(yàn)開始第17天)處死存活小鼠，觀察四組小鼠結(jié)腸的大體形態(tài)、同時(shí)用流式細(xì)胞儀測定小鼠脾臟中的CD4+CD25+細(xì)胞(Treg)、CD19+IL-10+細(xì)胞(IL-10+的Breg細(xì)胞)和CD19+TGF-β+細(xì)胞(TGF-β+的Breg細(xì)胞)的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：(1)與TNBS+OVA-組死亡率35％相比，TNBS+OVA+組小鼠死亡率為15％，死亡率明顯下降(P<0.05)。與TNBS+

4、OVA-組相比，TNBS+OVA+組小鼠結(jié)腸肉眼炎癥程度明顯減輕。(2)經(jīng)血吸蟲卵作用后，TNBS-OVA+組小鼠脾臟組織中Treg細(xì)胞比例較ctrl組顯著增加(7.24±0.14％vs5.53±2.29％，P<0.05)，TNBS+OVA+組小鼠脾臟組織中Treg細(xì)胞比例較TNBS+OVA-組顯著增加(6.56±3.79％vs4.91±0.94％，P<0.05)。(3)經(jīng)血吸蟲卵作用后，TNBS-OVA+組小鼠脾臟組織中IL-10+細(xì)

5、胞比例較ctrl組顯著降低(21.07±5.86％vs73.64±7.40％，P<0.05)：TNBS+OVA+組小鼠脾臟組織中IL-10+細(xì)胞比例較TNBS+OVA-組顯著降低(9.21±1.47％vs74.19±9.87％，P<0.05)。另，TNBS-OVA+組小鼠脾臟組織中IL-10+Breg細(xì)胞比例較ctrl組顯著降低(21.03±5.45％vs44.16±3.48％，P<0.05)；TNBS+OVA+組小鼠脾臟組織中IL-1

6、0+Breg細(xì)胞比例較TNBS+OVA-組顯著降低(8.69±1.54％vs40.55±4.07％，P<0.05)。(4)經(jīng)血吸蟲卵作用后，TNBS-OVA+組小鼠脾臟組織中TGF-β+細(xì)胞比例較ctrl組顯著降低(60.71±12.64％vs96.95±1.34％，P<0.05)；TNBS+OVA+組小鼠脾臟組織中TGF-β+細(xì)胞比例較TNBS+OVA-組顯著降低(68.59±9.90％vs97.57±0.97％，P<0.05)。另，

7、TNBS-OVA+組小鼠脾臟組織中TGF-β+Breg細(xì)胞比例較ctrl組顯著降低(16.81±3.28％vs43.68±2.83％，P<0.05)；TNBS+OVA+組小鼠脾臟組織中TGF-β+Breg細(xì)胞比例較TNBS+OVA-組顯著降低(7.24±5.0％vs48.41±3.98％，P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　(1)日本血吸蟲卵能促進(jìn)Treg細(xì)胞的表達(dá)，從而改善炎癥性腸病的嚴(yán)重程度。
　　(2)本實(shí)驗(yàn)暫無法