黃芩湯對濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠γδT細胞及NF-κB的影響.pdf

1、應(yīng)用復合法和中醫(yī)致病因素相結(jié)合的造模方法,構(gòu)建與人體臨床證候最接近的濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠動物模型;以黃芩湯治療該模型的療效為評價指標,探討黃芩湯對該模型γδT細胞及NF-KB的影響,進一步闡述其治療濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠的可能免疫機制。
　　 方法：
　　 SPF級SD大鼠140只,雌雄各半,體重(200士20)g,于18-22℃室溫下適應(yīng)性飼養(yǎng)7天后,隨機選取40只為空白對照組和無證型UC組(各20只),其余100只

2、為濕熱造模組,采用灌服豬油、白酒并自由飲用蜂蜜水的方法,造成大鼠濕熱體質(zhì);在此基礎(chǔ)上用免疫復合物加三硝基苯磺酸-乙醇模型誘發(fā)濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎,觀察大鼠癥候?qū)W、結(jié)腸病理學及免疫學指標腫瘤壞死因子-α、干擾素-γ、細胞間粘附分子-1的改變,判定造模是否成功。造模成功后初步為該模型建立癥候?qū)W、病理學及免疫學三大指標評價體系。
　　 造模成功后,治療15天,分別運用黃芩湯、白頭翁湯、柳氮磺吡啶(SASP)懸濁液、生理鹽水對模型大鼠進行

3、干預,觀察癥候?qū)W、病理學的改善情況,檢測與γδT細胞和核因子-K B p65(NF-K B p65)密切相關(guān)的結(jié)腸組織細胞因子腫瘤壞死因子-α、干擾素-γ的含量;并應(yīng)用抗TCRγδ,核因子-K B p65(NF-K Bp65)、細胞間粘附分子-1(ICAM-1)進行免疫組化染色;顯微鏡細胞計數(shù)和彩色病理圖象分析系統(tǒng)分析各組結(jié)腸組織TCRγδ、核因子-K B p65、細胞間粘附分子-1的表達情況;用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理。

4、
　　 結(jié)果：
　　 造模大鼠粘液血便、懶動、食欲減退、體重下降等癥狀,疾病活動度(DAI)比空白組高(P＜0.05);病理切片可見結(jié)腸粘膜出現(xiàn)明顯潰瘍,病理學評分有顯著性差異(P＜0.01)免疫學指標結(jié)腸組織ICAM-1,TNF-α和IFN-γ明顯升高(P＜0.01)。
　　 經(jīng)藥物干預,各組大鼠的癥候?qū)W及病理學有不同程度的改善,以黃芩湯治療.濕熱型UC組最明顯。在免疫學指標方面,TCRγδ、NF-K B p6

5、5、ICAM-1免疫組織化學分析結(jié)果:模型組TCRγδ、NF-K B p65、ICAM-1較正常對照組升高。治療后黃芩湯治療濕熱UC組TCRγδ、NF-K B p65、ICAM-1含量較其他組降低,差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05,P＜O.01);各治療組大鼠結(jié)腸組織TNF-α和IFN-γ通過用ELISA方法檢測,治療后有不同程度的回升,仍以黃芩湯治療濕熱UC組明顯,且效果優(yōu)于陽性對照藥白頭翁湯及SASP、無證型UC組(P＜0.05,

6、P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 經(jīng)過改進以前的造模方法,采用高脂高糖辛辣飲食加復合法可以構(gòu)建出理想的濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎模型,且該方法穩(wěn)定可靠。
　　 黃芩湯治療濕熱UC組對該模型癥候及病理學具有理想的改善作用,且對γδT細胞數(shù)量及功能和NF-KBp65有下調(diào)作用,效果優(yōu)于陽性對照藥白頭翁湯及SASP,這可能是其治療濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠的免疫學機制之一;黃芩湯治療濕熱UC組的效果亦優(yōu)于無濕熱證型UC組,這表