辛伐他汀對(duì)TNBS誘導(dǎo)的大鼠結(jié)腸炎Th17-Treg平衡的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的:炎癥性腸病是腸道黏膜慢性復(fù)發(fā)性炎癥，其機(jī)制不是很清楚，免疫反應(yīng)異常是其主要機(jī)制之一。他汀類藥物是HMG-CoA抑制劑，許多研究顯示該類藥物可作用于不同的免疫反應(yīng)途徑，因此能夠參與免疫的調(diào)節(jié)。采用TNBS復(fù)制結(jié)腸炎模型，探討Th17及Treg細(xì)胞失衡在其發(fā)病過程中的作用，并采用辛伐他汀干預(yù)，了解其在實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎中的干預(yù)效應(yīng)并探討作用機(jī)理。
　　方法:40只雄性SD大鼠，隨機(jī)分5組:對(duì)照組（N組）、模型組（TNBS組）、辛伐他汀

2、分為低劑量(SL組，5mg/kg)和高劑量(SH組，20mg/kg)兩個(gè)組、柳氮磺嘧啶組(SASP組，400mg/kg)。后四組小鼠用5％TNBS+50％乙醇(v/v)溶液復(fù)制大鼠急性結(jié)腸炎模型，SL組和SH組在造模后分別灌胃不同劑量的辛伐他汀溶液，TNBS模型組在造模后使用相同量的生理鹽水灌胃，一天一次，對(duì)照組大鼠經(jīng)直腸灌注等容積的0.9％Nacl溶液后每天灌胃0.9％Nacl溶液2ml，連續(xù)7d。實(shí)驗(yàn)過程中，觀察相關(guān)指標(biāo)，每天記錄并

3、觀察各組大鼠DAI評(píng)分，干預(yù)7d后，采集標(biāo)本并肉眼觀察結(jié)腸粘膜病變程度，行CMDI評(píng)分，HE染色后觀察病理改變，并行TDI評(píng)分，以酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢查血清中IL-17及IL-22、IL-10的水平，以免疫組化法檢測(cè)結(jié)腸組織中IL-17、Foxp3的表達(dá)，RT-PCR檢查結(jié)腸組織RORγt、Foxp3 mRNA表達(dá)量。組間比較采用單因素方差分析。
　　結(jié)果:1、與對(duì)照組比較，模型及各干預(yù)組DAI、CDMI及TDI評(píng)分均升高，

4、差異顯著，具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明復(fù)制結(jié)腸炎模型成功。2、ELISA法檢測(cè)TNBS組及各治療組中大鼠血清中IL-17、IL-22水平，與對(duì)照組之間相較，顯著升高，各個(gè)組之間相較，有顯著差異(P=0.000)，不同治療組與TNBS組之間比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。各治療組及TNBS組IL-10水平較對(duì)照組升高，差異有意義(P＜0.05)，不同治療組與TNBS組比較明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。3、免疫組化法結(jié)果顯示:7天后，檢

5、測(cè)各組結(jié)腸粘膜組織IL-17表達(dá)，差異有意義(P＜0.05)。TNBS組IL-17表達(dá)量升高，與對(duì)照組相比較，具統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.000)。TNBS組與SH組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.002)，與SL及SASP組比較差異無(wú)意義。給藥后各組大鼠結(jié)腸粘膜Foxp3表達(dá)，差異具顯著性(P=0.000)，與對(duì)照組相比，TNBS組中Foxp3的表達(dá)量升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.010)。TNBS與SH組比較，有顯著差異(P=0.000)，而與

6、SL、SASP組相比較，無(wú)意義。4、對(duì)照組的結(jié)腸粘膜中RORγt及Foxp3較少量的表達(dá)。TNBS組中RORγtmRNA表達(dá)量較對(duì)照組明顯升高，而SH組干預(yù)后，RORγtmRNA的表達(dá)顯著低于TNBS組(P＜0.05)。TNBS組Foxp3有一定程度表達(dá)，經(jīng)過治療后，F(xiàn)oxp3 mRNA表達(dá)量明顯上調(diào)，組間比較，差異具意義(P=0.000)。
　　結(jié)論:1、Th17/Treg之間平衡失調(diào)與TNBS復(fù)制的結(jié)腸炎的發(fā)病過程相關(guān)。2、辛