硫代葡萄糖苷glucoraphanin和glucoraphenin生物轉(zhuǎn)化的研究及glucoraphenin降解產(chǎn)物萊菔硫烷穩(wěn)定性研究.pdf

1、硫代葡萄糖苷是次生代謝產(chǎn)物，主要存在于雙子葉被子植物中。硫代葡萄糖苷可作為抗微生物制劑、殺蟲(chóng)劑和天然熏蒸消毒劑，異硫氰酸酯是其多種降解產(chǎn)物中的一種。異硫氰酸酯除具有強(qiáng)烈的辛辣氣味可作為調(diào)味品外，還具有抗病毒、抑菌和抗癌活性，能夠有效的防止飲食中如雜環(huán)胺、多環(huán)芳烴和亞硝胺等多種致癌物所引起的DNA損傷和癌癥。因此，硫甙的研究吸引了眾多食品化學(xué)、醫(yī)藥和生物學(xué)家的興趣。本文則主要對(duì)硫代葡萄糖苷glucoraphanin的生物降解及其降解產(chǎn)物萊

2、菔硫烷的穩(wěn)定性及中藥萊菔子中g(shù)lucoraphenin的生物轉(zhuǎn)化工藝進(jìn)行研究。
　　 首先對(duì)本實(shí)驗(yàn)室32株菌株對(duì)硫代葡萄糖苷glucoraphanin和glucoraphenin的生物轉(zhuǎn)化能力進(jìn)行篩選。結(jié)果表明，共有25種菌株對(duì)glucoraphanin具有降解能力，其中鏈格孢、柱孢對(duì)glucoraphanin的降解能力比較強(qiáng)4種菌株對(duì)glucoraphenin具有還原能力，其中束梗頭孢對(duì)glucoraphanin的降解能力比較

3、強(qiáng)。
　　 其次，采用單因素實(shí)驗(yàn)法通過(guò)動(dòng)態(tài)研究，每60mL菌絲懸浮液中加入20mg/L底物，在25℃、160rpm的條件下轉(zhuǎn)化96小時(shí)為最佳條件，培養(yǎng)基中的葡萄糖濃度控制在1％。另外，通過(guò)對(duì)靜息細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)glucoraphanin降解條件的研究表明，該反應(yīng)的最適pH在6.5-7.5之間。
　　 采用單因素實(shí)驗(yàn)法對(duì)可能影響glucoraphenin轉(zhuǎn)化率的因素進(jìn)行研究，確定轉(zhuǎn)化的最佳時(shí)間為給藥后96小時(shí)，pH6-8，加藥量

4、為40μg/mL。采用液相色譜、紫外掃描、液質(zhì)連用技術(shù)對(duì)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物進(jìn)行初步鑒定，從鑒定結(jié)果分析，轉(zhuǎn)化產(chǎn)物為目標(biāo)產(chǎn)物glucoraphanin。
　　 另外本文利用自制的高純度萊菔硫烷，采用HPLC測(cè)定萊菔硫烷的含量，考察了不同溫度、光照、空氣中的氧氣和不同的包裝材料對(duì)萊菔硫烷油狀原液穩(wěn)定性的影響，以確定其最適保存條件。實(shí)驗(yàn)表明高溫加熱時(shí)間較長(zhǎng)萊菔硫烷含量會(huì)出現(xiàn)明顯降低，降解產(chǎn)物含量增加。萊菔硫烷對(duì)熱不穩(wěn)定，隨溫度升高或加熱時(shí)間的延