小白菜硫代葡萄糖苷含量及芳香族硫苷合成相關(guān)基因CYP79A2的克隆.pdf

1、硫代葡萄糖苷是一種廣泛存在于十字花科植物中的重要含氮、硫次生代謝物。由于其在黑芥子酶作用下的降解產(chǎn)物異硫代氰酸鹽有生物防御、抗菌及抗癌等作用，日益受到人們的重視。
　　 本論文研究了小白菜杭州油冬兒在不同生長期不同部位的硫苷含量變化，以及7個品種小白菜地上部和根系的硫苷含量，并且成功克隆到在芳香族硫苷合成過程中的關(guān)鍵基因CYP79A2。
　　 在小白菜中共檢測到7種硫苷，分別是5-甲基亞磺酰戊基硫苷、3-丁烯基硫苷、4-

2、戊烯基硫苷、吲哚-3-甲基硫苷、2-苯乙基硫苷、4-甲氧基吲哚-3-甲基硫苷、1-甲氧基吲哚-3-甲基硫苷。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)不同生長期的硫苷含量存在差異，硫苷含量一般隨著生長時(shí)間先升高后降低，因此為獲得高硫苷含量的小白菜需適時(shí)收獲。葉片和葉柄的硫苷含量和種類較為相似，在葉片和葉柄都中含有大量的脂肪族硫苷，在根部芳香族硫苷占絕對多數(shù)。不同品種小白菜硫苷含量存在差異，但在各品種中地上部的脂肪族硫苷含量都高于根部，吲哚族和脂肪族則是根部高于地上部，可

3、以通過品種選育的方法來獲得高含量目標(biāo)硫苷的品種。
　　 根據(jù)擬南芥和大白菜CYP79A2基因的序列設(shè)計(jì)特異性引物，從小白菜品種杭州油冬兒中提取到的RNA克隆到小白菜CYP79A2的cDNA序列，其編碼區(qū)為1572 bp，推導(dǎo)的蛋白質(zhì)有523個氨基酸，分子量為59.33 kDa，目前在Genebank只找到擬南芥和大白菜存在同源基因，與本實(shí)驗(yàn)克隆到的基因相比，相似性分別為85.42％和96.98％。CYP79A2在硫苷合成過程中將