新生大鼠內(nèi)耳增殖細(xì)胞及其分化細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)觀察.pdf

1、目的：
　　觀察新生大鼠內(nèi)耳增殖細(xì)胞及其分化細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，為耳源性干細(xì)胞的生物學(xué)功能研究提供一定的形態(tài)學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　1.內(nèi)耳增殖細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)觀察：選取新生3天內(nèi)的SD大鼠，分離取出耳蝸感覺(jué)上皮（Corti氏器）、球囊感覺(jué)上皮及橢圓囊感覺(jué)上皮，分別經(jīng)無(wú)血清培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)7天，收集所形成的細(xì)胞球，制作成掃描電鏡及透射電鏡樣本，進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)觀察。
　　2.內(nèi)耳增殖細(xì)胞之分化細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)觀察：將培養(yǎng)所得

2、的耳蝸感覺(jué)上皮、球囊感覺(jué)上皮及橢圓囊感覺(jué)上皮的增殖細(xì)胞，進(jìn)行貼壁分化，收集分化細(xì)胞制作掃描電鏡標(biāo)本，進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)觀察。
　　3.對(duì)內(nèi)耳增殖細(xì)胞及其分化細(xì)胞進(jìn)行免疫組化鑒定。
　　結(jié)果：
　　1.新生大鼠耳蝸感覺(jué)上皮、球囊感覺(jué)上皮及橢圓囊感覺(jué)上皮經(jīng)分離懸浮培養(yǎng)均可形成細(xì)胞球，且對(duì)nestin均呈陽(yáng)性表達(dá)；其分化細(xì)胞對(duì)nestin及myosin7A均呈陽(yáng)性表達(dá)。
　　2.掃描電鏡顯示細(xì)胞球表面有許多微絨毛樣結(jié)構(gòu)，其分

3、化細(xì)胞為隆起的長(zhǎng)梭形或多角形的纖維樣細(xì)胞，細(xì)胞周圍有許多細(xì)長(zhǎng)突起貼壁生長(zhǎng)。透射電鏡顯示細(xì)胞球內(nèi)細(xì)胞形態(tài)規(guī)整，相鄰細(xì)胞間排列緊密，存在有多種細(xì)胞連接方式，并觀察到有細(xì)胞膜相互融合。球內(nèi)細(xì)胞表面有許多微絨毛樣結(jié)構(gòu)，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)豐富的線粒體、粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、核糖體和空泡樣結(jié)構(gòu)，還發(fā)現(xiàn)有微絲及自噬體。細(xì)胞核較大，核質(zhì)比高，細(xì)胞核呈多種形態(tài)，并有核分裂現(xiàn)象。
　　3.耳蝸組（耳蝸感覺(jué)上皮）與前庭組（球囊感覺(jué)上皮及橢圓囊感覺(jué)上皮）相比