MSCs、NSCs及其分化的超微結(jié)構(gòu)和免疫組化研究.pdf

1、　　目的：建立骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和神經(jīng)干細(xì)胞體外定向誘導(dǎo)模型并鑒定跨胚層分化可能性為其更廣泛的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。 方法：選用雄性鼠股骨、孕齡16天的胎鼠腦進(jìn)行MSCs、NSCs體外分離、培養(yǎng)及傳代。分為3大組：MSCs培養(yǎng)誘導(dǎo)組(分為誘導(dǎo)7天組，誘導(dǎo)14天組)；MSCs對(duì)照組(培養(yǎng)未誘導(dǎo)14天組)；NSCs組(分為干細(xì)胞組，誘導(dǎo)7天組，誘導(dǎo)14天組)分別光鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，除了NSCs干細(xì)胞組分離固定后電鏡觀察外，MSCs對(duì)照

2、組未誘導(dǎo)14天后，其余各組在誘導(dǎo)7、14天后固定進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色及電鏡觀察?！　〗Y(jié)論：1、MSCs誘導(dǎo)組NF、MAP2、anti-noradrenaline、anti-dopamine、anti-γ-aminobutyrieacid、anti-acetylcholine均呈陽(yáng)性表達(dá)。電鏡觀察：少數(shù)細(xì)胞有突起形成和“突觸樣結(jié)構(gòu)”/緊密聯(lián)結(jié)，但其中分泌小泡發(fā)育不完全，表明MSCs在短期體外誘導(dǎo)環(huán)境下可能向神經(jīng)元方向分化?！　?、NS

3、Cs誘導(dǎo)組NF、MAP2、anti-noradrenaline、anti-dopamine、anti-γ-aminobutyricacid、anti-acetylcholine均呈陽(yáng)性表達(dá)。電鏡觀察：出現(xiàn)明顯的分化趨向，胞漿明顯增多，細(xì)胞突起細(xì)長(zhǎng)，其中含有大量神經(jīng)微絲(中等微絲)，胞漿中含有大量?jī)?nèi)分泌(神經(jīng))顆粒，可見(jiàn)有髓鞘樣結(jié)構(gòu)，線粒體有典型發(fā)育結(jié)構(gòu)。表明NSCs在體外誘導(dǎo)環(huán)境下向神經(jīng)元方向分化良好。　　3、本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)一步證明N