臭牡丹有效成分的提取及其細(xì)胞保護和抗炎機制研究.pdf

1、哮喘是一種以氣道變應(yīng)性炎癥及氣道高反應(yīng)為特征的慢性反復(fù)發(fā)作性呼吸道疾病。臨床治療主要以支氣管擴張劑和抗炎劑聯(lián)合治療，雖然這些藥物可以治療或緩解氣道高反應(yīng)，但不能解決病情反復(fù)發(fā)作和阻斷氣道結(jié)構(gòu)重塑與肺功能衰退進程等問題?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)實踐證明，許多中藥在體內(nèi)都具有抗炎，抑菌和免疫刺激作用。臭牡丹(Clerodendrum Bungei)，馬鞭草科，為常用的民族藥材，具有活血化瘀、清熱利濕、消腫止痛、解毒等功效。近來研究發(fā)現(xiàn)，其提取液具有對抗遲發(fā)

2、型超敏反應(yīng)和細(xì)胞免疫的抑制作用。本研究前期研究發(fā)現(xiàn)，臭牡丹經(jīng)萃取得到石油醚部分、氯仿部分和水部分三個部分，經(jīng)過活性評價，發(fā)現(xiàn)氯仿部分最能減輕臭氧攻擊所造成氣道與肺泡病理改變，炎癥反應(yīng)及氣道高反應(yīng)。氯仿部分經(jīng)硅膠柱層析得到A、B、C、D、E和F六個活性組分，經(jīng)過活性評價，活性組分B和C最能夠減輕上述病理反應(yīng)?；钚越M分B中提取的化合物1和活性組分C中提取的化合物2為相同化合物。本研究在前期研究的基礎(chǔ)上，提取分離臭牡丹治療氣道高反應(yīng)性疾病的有

3、效單體，鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)，并就其藥理機制等方面做進一步研究，為臨床用藥提供科學(xué)性和可靠性依據(jù)。
　　目的:提取分離臭牡丹治療氣道高反應(yīng)性疾病的有效單體，鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)，在細(xì)胞水平探討其藥理機制。
　　方法:①對臭牡丹總提物依次用石油醚、氯仿萃取，硅膠柱層析法、聚酰胺柱層析法分離，并用高效液相色譜分析法進行提純，最后得到有效單體。采用紫外光譜分析、紅外光譜分析、H譜分析和C譜分析等光譜方法對有效單體進行結(jié)構(gòu)鑒定。②MTT法檢測臭

4、牡丹有效單體對人支氣管上皮細(xì)胞活力的影響。③采用不同濃度(0.1-25μg/ml)臭牡丹有效單體預(yù)處理HBECs，在O3和LPS應(yīng)激作用下，觀察其對HBECs的ROS，LDH，Catalase，5-LOX活性的影響。
　　結(jié)果:①紫外光譜分析、紅外光譜分析、H譜分析和C譜分析等光譜方法鑒定臭牡丹有效單體為醌類化合物。②MTT法結(jié)果提示有效單體在0.1-25ug/ml濃度范圍內(nèi)對HBECs活力沒有影響③O3應(yīng)激使HBECs的LDH釋