Bcl-2在腦缺血損傷中的過表達及其效應(yīng)研究.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文Bcl-2在腦缺血損傷中的過表達及其效應(yīng)研究姓名：薛煜煜申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)生物學(xué)指導(dǎo)教師：孫鳳艷20030508復(fù)墮大學(xué)傾上學(xué)位論文 B c l - 2 在腦缺血損傷中的過表達搜其效應(yīng)研究A B S T R A C TA c u t ec e r e b r a li s c h e m i a c a u s e sh y p o x i c n e u r o n a ld e a t h ，i n c

2、 l u d i n gn e c r o s i sa n da p o p t o s i s ．B c l ·2 ．a(chǎn) n a p o p t o t i c i n h i b i t o r , w a si n d u c t e dt o e x p r e s s i n t h e i s c h e m i ci n j u r e db r a i n ．O v e r —e x p r e s s i

3、o n o f b c l - 2b yg e n et r a n s f e c t i o nw i t h a d e n o —a s s o c i a t e dv i r u s v e c t o r c a l lp r o d u c ea n e u r o p r o t e c t i o na g a i n s t i s c h e m i cn e u r o n a l d a m a g ei n

4、m a n yd i f f e r e n t m o d e l s ．I t s e e m st h a t t h e u p ·r e g u l a t i o n o fb c l 一2 e x p r e s s i o n i ni s c h e m i c b r a i nm a yp r o v i d eau s e f u l t h e r a p e u t i c s t r a t e

5、g y f o r a l l e v i a t i n gi s c h e m i cn e u r o n a ld a m a g e ．A l t h o u g h a d e n o —a s s o c i a t e dv i r u sv e c t o rw a s w i d e l yu s e df o rt h em a m m a l i a ng e n et r a n s f e c t i o

6、ni nv i v oa n di nv i t r om o d e l s ，i ts t i l l c a n n o tc o m p l e t e l ye x c l u d e t h e p o t e n t i a l t o x i c i t y o f v i r u s ．T h e r e f o r e ，i n t h e p r e s e n t s t u d y ,p E G F P

7、83;- N 1 ·- B c l - ·2 m a m m a l i a ne x p r e s s i v ev e c t o rm i x e dw i t hl i p o s o m ew a su s e dt oi n j e c ti n t r a p a r e n c h y m a l l yo ri n t r a v e n t r i c u l a r l yt ot h ei

8、p s i l a t e r a lb r a i n o f r a t sf o l l o w i n ga t r a n s i e n tm i d d l e c e r e b r a la r t e r yo c c l u s i o n ．T h e r e s u l t sa r e a sf o l l o w s ：1 ．W h e nE G F Ps i n g l e w a su s e dt o

9、 c h e c kt h e e f f e c t i v e n e s s o ft r a n s f e c t i o n ，w eo b s e r v e dt h a tb o t hv e c t o r sc o u l d e x p r e s sE G F P p r o t e i n ．I n t h ep E G F P - N —B e l 一2v e c t o r g r o u p ，a l

10、l E G F P - p o s i t i v ec e l l s c o - s t a i n e d w i t h b c l - 2 i n t h e i p s i l a t e r a lh e m i s p h e r e o fr a t b r a i n e i t h e r i n t r a p a r e n c h y m a l o r i n t r a v e n t r i c u l

11、 a r i n j e c t i o n ，s u g g e s t i n gt h o s e v e c t o r sw e r e s u c c e s s f u lt o e x p r e s st a r g e t p r o t e i n s u n d e rt h ep r e s e n tc o n d i t i o n ．T oc o m p a r e w i t h t h e i re

12、f f i c a c yo f t r a n s f e c t i o n ，w ef o u n dt h a ti n t r a v e n t r i c u l a r i n j e c t i o nw a s m o r e e f f e c t i v et h a n i n t r a p a r e n c h y m a l i n j e c t i o n ．2 ，I s c h e m i ci

13、n f a r c tv o l u m ew a sm e a s u r e di n e a c hr a ti n j e c t e dw i t hp E G F P —No rp E G F P - N - B c l ·- 2 v e c t o r ．C r e s y l v i o l e ts t a i n i n gc o m b i n e d w i t h i m a g e s y s t

14、e mw a su s e d t oo b s e r v e t h e n e u r o n a l m o r p h o l o g y ．T h e r e s u l ts h o w e d t h a tt h e e x p r e s s i o no f b c l ．2 - E G F Pf u s i o np r o t e i ni nt h ei n t r a v e n t r i c u l a

15、 r l yi n j e c t e dr a t sc o u l dr e d u c et h ei n f a r c tv o l u m eb u tw i t h o u ts t a t i s t i c a l s i g n i f i c a n c e ，w h i c hm a y b ec a u s e db ys m a l ln u m b e r so fe x p e r i m e n t a

16、 la n i m a l ．H o w e v e r , w eo b s e r v e dt h a t t h e c e l l se x p r e s s e dw i t hb c l ·- 2 ·- E G F P f u s i o np r o t e i ni n t h ei s e h e m i cr e g i o n sw e r em o r eh e a l t ht h a