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文檔簡介
1、目的:通過觀察大鼠肝纖維化形成過程中血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)、血管緊張素(1-7)[Ang(1-7)]、Mas受體、轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)及結(jié)締組織生長因子(CTGF)的動態(tài)變化,探討ACE2-Ang(1-7)-Mas受體軸在肝纖維化形成過程中的作用機制。
方法:成年雄性Wistar大鼠36只,隨機取6只為正常對照組(N組),余30只給予40%CCl4制備肝纖維化模型(M組),首次按5ml/kg皮下注射,以
2、后每次3ml/kg,每3天1次;每次給藥均根據(jù)體重調(diào)整CCl4用量。分別在造模第15、30、45、60、75天隨機處死6只,對各組大鼠肝組織進(jìn)行HE及Masson染色觀察其病理改變,ELISA檢測肝組織Ang(1-7)的水平,Western blotting及Real-time PCR方法檢測ACE2、Mas受體、TGF-β1、CTGF蛋白及其mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:
(1)病理結(jié)果:隨著造模時間的延長,模型
3、組大鼠的肝纖維化程度逐漸加重,造模第75天肝內(nèi)可見少量假小葉形成。
(2) ELISA結(jié)果:與正常對照組比較,模型組各時間段Ang(1-7)含量均增高(P<0.01),并呈逐漸上升趨勢,15、30、45、60天模型組相鄰兩組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義,但75天模型組與60天模型組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
(3) ACE2mRNA及其蛋白的檢測結(jié)果:與正常對照組比較,ACE2mRNA及其蛋白的表達(dá)均增多(P<0.0
4、1),相鄰兩組間比較差異亦均有統(tǒng)計學(xué)意義,但75天模型組較60天模型組ACE2mRNA及其蛋白的表達(dá)水平均有所下降(P<0.01)。
(4) Mas受體mRNA及其蛋白的檢測結(jié)果:與正常對照組比較,各個時間段模型組Mas受體mRNA及其蛋白的表達(dá)水平均增高(P<0.01),15、30、45、60天模型組相鄰兩組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義,但75天模型組與60天模型組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
(5) TGF-β1m
5、RNA及其蛋白的檢測結(jié)果:隨著肝纖維化進(jìn)展,模型各組TGF-β1mRNA及其蛋白的表達(dá)水平較正常對照組均增高(P<0.01),并呈逐漸上升趨勢,相鄰兩組間比較亦均有統(tǒng)計學(xué)意義。(6) CTGFmRNA及其蛋白的檢測結(jié)果:隨著肝纖維化進(jìn)展,模型各組CTGFmRNA及其蛋白的表達(dá)水平較正常對照組均增高(P<0.01),并呈逐漸上升趨勢,相鄰兩組間比較亦均有統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)論:肝纖維化形成前期,ACE2-Ang(1-7)-Mas
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