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文檔簡介
1、目的:
通過體外培養(yǎng) HSC-T6,從分子水平探究 Ang(1-7)對體外活化的 HSC ACE2mRNA、Mas受體mRNA及IGFBP-2mRNA的影響,從而證實體外HSC中是否表達ACE2、Mas受體mRNA、IGFBP-2mRNA及ACE2-Ang(1-7)-Mas軸與HF的關系,為臨床HF的診斷及治療提供理論依據(jù)。
方法:
大鼠HSC株(HSC-T6)在37℃,5%CO2環(huán)境下,培養(yǎng)在10%胎牛血
2、清,100U/ml雙抗的1640培養(yǎng)基當中,每周傳代2-3次,按實驗計劃進行細胞干預實驗,將實驗分組為五組:1.對照組;2.AngⅡ組;3.Ang(1-7)組;4.AngⅡ+Ang(1-7)組;5.AngII+Ang(1-7)+A779(為Mas受體的拮抗劑)組;分組處理后均在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時,然后裂解細胞,提取細胞總RNA,進行逆轉錄,應用實時熒光定量PCR的方法檢測ACE2mRNA、Mas受體mRNA及IGFBP-2mRNA的表
3、達。
結果:
?。?)ACE2mRNA、Mas受體mRNA、IGFBP-2mRNA在AngⅡ處理組較對照組表達明顯上調(P<0.05);(2)ACE2mRNA在AngⅡ+Ang(1-7)處理組較AngⅡ處理組中表達增強(P<0.05);Mas受體mRNA在AngⅡ+Ang(1-7)處理組表達較AngⅡ處理組增強;IGFBP-2mRNA在AngⅡ+Ang(1-7)處理組表達較AngⅡ處理組減弱(P<0.05);(3)AC
4、E2mRNA、Mas受體mRNA及IGFBP-2mRNA在AngⅡ+Ang(1-7)+A779處理組與AngⅡ組的表達無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
結論:
?。?)活化的HSC表達ACE2、Mas及IGFBP-2mRNA(2)AngⅡ可以激活肝星狀細胞,且ACE2、Mas受體mRNA、IGFBP-2mRNA表達升高(3)Ang(1-7)使活化的HSC中ACE2mRNA、Mas受體mRNA表達增強、IGFBP-2mRN
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