乙酰膽堿對(duì)人垂體腺瘤細(xì)胞增殖的抑制作用及其機(jī)理的初步研究.pdf

1、第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文乙酰膽堿對(duì)人垂體腺瘤細(xì)胞增殖的抑制作用及其機(jī)理的初步研究姓名：遲素敏申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：生理學(xué)指導(dǎo)教師：王復(fù)周朱運(yùn)龍2001.6.1第四軍醫(yī)大學(xué)博士掌位論文用，是理解Ach影響垂體前葉細(xì)胞分泌功能的基礎(chǔ)，其結(jié)果不僅有助于充分認(rèn)識(shí)垂體前葉的旁分泌網(wǎng)絡(luò)，而且，對(duì)于了解垂體腺瘤的發(fā)生、發(fā)展也將產(chǎn)生積極的影響。在體情況下，Ach主要在膽堿能神經(jīng)細(xì)胞的終末合成，并在神經(jīng)沖動(dòng)到來(lái)時(shí)釋放，然后很快被酶水解或回?cái)z，很難作遠(yuǎn)距

2、離擴(kuò)散a而實(shí)驗(yàn)證明多種動(dòng)物的正常垂體前葉細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞都可以合成及分泌Ach，提示Ach能以自分泌或旁分泌的方式在垂體內(nèi)起作用。因此，人的正常垂體和垂體腺瘤內(nèi)是否存在合成Ach所必需的酶膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(cholineacetyltransferase，CHAT)，Ach對(duì)垂體腺瘤細(xì)胞的增殖是否有影響，以及Ach通過(guò)何種途徑起作用等則是研究Ach對(duì)人的垂體和垂體腺瘤影響的關(guān)鍵所桎，)皤本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組織化學(xué)、MTT和3HTdR參入法、流式

3、細(xì)胞儀檢測(cè)法、共聚焦顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞【Ca2】i方法、TUNEL以及放免等方法研究了ChAT在人正常垂體和三種垂體腺瘤(催乳素瘤、生長(zhǎng)激素瘤和無(wú)功瘤)的表達(dá)；觀察了Ach對(duì)三種垂體腺瘤細(xì)胞增殖和代謝的影響，并初步分析了其作用機(jī)制。／結(jié)果表明：1免疫組織化學(xué)方法顯示三種垂體腺瘤細(xì)胞中存在ChAT免疫陽(yáng)性物質(zhì)，ChAT免疫陽(yáng)性物質(zhì)存在于細(xì)胞的胞漿中。在人正常垂體前葉細(xì)胞中同樣也存在CILAT免疫陽(yáng)性物質(zhì)。這表明人正常垂體前葉和實(shí)驗(yàn)所觀察的三種

4、垂體腺瘤細(xì)胞中具有合成Ach的關(guān)鍵酶。說(shuō)明Ach可以在垂體前葉細(xì)胞內(nèi)和／或垂體腺瘤細(xì)胞內(nèi)合成并釋放，由于垂體前葉細(xì)胞表面存在著功能性的M型膽堿能受體，提示Ach可以在垂體前葉內(nèi)和／或垂體腺瘤內(nèi)以旁分泌或自分泌的形式起作用，影響著垂體前葉細(xì)胞的分泌功能及其細(xì)胞的增殖與分化。2采用MTT和3HTdR參入實(shí)驗(yàn)表明，Ach能抑制三種垂體腺瘤細(xì)胞的增殖和DNA的合成，其抑制作用的程度與Ach的作用濃度有關(guān)，并呈劑量依賴效應(yīng)(PO01)。此抑制作用