小尾寒羊GDF9基因和BMP15基因多態(tài)性及其與高繁殖力關系的研究.pdf

1、本研究以控制Belclare、Cambridge、Hanna和Inverdale綿羊高繁殖力的骨形態(tài)發(fā)生蛋白15(bonemorphogeneticprotein15，BMP15)基因及控制Belclare和Cambridge綿羊高繁殖力的生長分化因子9(growthdifferentiationfactor9，GDF9)基因為候選基因，根據(jù)綿羊BMP15和GDF9基因全序列各設計6對引物覆蓋全部的外顯子，采用PCR-SSCP方法檢測B

2、MP15基因和GDF9基因外顯子1和外顯子2在小尾寒羊和多賽特羊中的多態(tài)性，同時研究這兩個基因?qū)π∥埠蚋叻敝沉Φ挠绊憽?對于GDF9基因，結果表明：只有外顯子2的第1對和第2對引物擴增片段在兩個綿羊品種中均具有多態(tài)性，其余4對引物均不具有多態(tài)性。對于引物2-1，在126只小尾寒羊母羊和30只多賽特母羊中都檢測到3種基因型(AA、AB、BB)；統(tǒng)計結果表明：小尾寒羊、多賽特羊AA基因型頻率分別為0.302、0.100，AB基因型

3、頻率分別為0.603、0.467，BB基因型頻率分別為0.095、0.433；測序結果表明：BB型和AA型相比在GDF9基因外顯子2第477位堿基處發(fā)生1個突變(G→A)，小尾寒羊和多賽特綿羊都產(chǎn)生了與Belclare、Cambridge綿羊相同的477G→A突變，該突變沒有導致氨基酸的改變；小尾寒羊產(chǎn)羔數(shù)的最小二乘均值關系為AA＞AB＞BB，但3種基因型間差異不顯著(P＞0.05)。對于引物2-2，在126只小尾寒羊母羊和30只多賽特

4、母羊中都檢測到2種基因型(CC、CD)；統(tǒng)計結果表明：小尾寒羊、多賽特羊CC基因型頻率分別為0.817、0.933，CD基因型頻率分別為0.183、0.067；測序結果表明：CD型和CC型相比在GDF9基因外顯子2第729位堿基處發(fā)生1個突變(G→T)，該突變導致243位氨基酸由谷氨酰胺改變?yōu)榻M氨酸；CD基因型小尾寒羊平均產(chǎn)羔數(shù)比CC基因型多0.77只，差異極顯著(P＜0.01)。本研究結果初步表明GDF9基因可能是控制小尾寒羊多胎性能

5、的一個主效基因或是與之存在緊密遺傳連鎖的分子標記。 對于BMP15基因，結果表明：只有外顯子1的第1對引物擴增片段具有多態(tài)性，其余5對引物擴增片段都沒有多態(tài)性。在127只小尾寒羊母羊和30只多賽特母羊中都檢測到兩種基因型(AA、AB)。統(tǒng)計結果表明：小尾寒羊、多賽特羊AA基因型頻率分別為0.638、0.800，AB基因型頻率分別為0.362、0.200。測序結果表明：AB型和AA型相比在cDNA第28bp處缺失了3個堿基(CTT