影響小尾寒羊高繁殖力候選基因的研究.pdf

1、本研究以性早熟、高繁殖力綿羊(Ovis aries)品種(小尾寒羊和湖羊)和性晚熟、低繁殖力品種(特克賽爾和多賽特)為試驗(yàn)材料，采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)、限制性片段長度多態(tài)(RFLP)、單鏈構(gòu)象多態(tài)(SSCP)、序列分析和基因克隆等方法研究IGF-I、IGF-Ⅱ和NPY候選基因的遺傳變異，并分析這些基因?qū)d羊性早熟和高繁殖力性狀的影響，尋找影響小尾寒羊高繁殖力和性早熟的主效基因或有較大關(guān)聯(lián)的基因型或遺傳標(biāo)記，以探索小尾寒羊高繁殖力及

2、性早熟的分子遺傳機(jī)理，為綿高繁殖性能的標(biāo)記輔助選擇提供科學(xué)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：
　　 1、IGF-I基因引物P1擴(kuò)增片段存在微衛(wèi)星多態(tài)性，在小尾寒羊(n=277)中檢測到6種基因型和3個(gè)等位基因，在湖羊(n=58)中檢測到7種基因型和4個(gè)等位基因，在特克塞爾(n=48)中檢測到2種基因型和2個(gè)等位基因，在多賽特(n=46)中檢測到4種基因型和4個(gè)等位基因；123/123 bp小尾寒羊產(chǎn)羔數(shù)分別比125/125 bp和125/

3、127 bp的多0.81只(P＜0.05)和1.03只(P＜0.01)，123/125 bp小尾寒羊產(chǎn)羔數(shù)分別比125/125 bp和125/127 bp的多0.46只(P＜0.05)和0.68只(P＜0.01)，123/123 bp和123/125 bp之間以及125/125 bp和125/127 bp之間小尾寒羊產(chǎn)羔數(shù)差異均不顯著(P＞0.05)。引物P2在小尾寒羊和湖羊中檢測到AA、AB和BB3種基因型，在特克塞爾中檢測到AA和A

4、B2種基因型，在多賽特中僅檢測到AA1種基因型；BB型與AA型相比在IGF-I基因調(diào)控區(qū)1511和1513 bp處同時(shí)發(fā)生了C→G和A→G的突變；BB型和AB型小尾寒羊產(chǎn)羔數(shù)分別比AA型的多0.96只(P＜0.05)和0.38只(P＜0.05)，BB型和AB型小尾寒羊產(chǎn)羔數(shù)差異不顯著(P＞0.05)。
　　 2、IGF-Ⅱ基因只有引物P1擴(kuò)增片段存在多態(tài)性，在4個(gè)綿羊品種中都檢測到GG、GA和AA3種基因型；AA型與GG型相比在

5、IGF-Ⅱ基因5’端調(diào)控區(qū)165 bp處發(fā)生了一個(gè)G→A的單堿基突變；GG、GA和AA基因型小尾寒羊產(chǎn)羔數(shù)差異均不顯著(P＞0.05)。
　　 3、NPY基因僅引物P1擴(kuò)增片段存在多態(tài)性，在小尾寒羊中檢測到5種基因型，在湖羊和多賽特中檢測到3種基因型，而在特克塞爾中僅檢測到一種基因型；測序分析顯示，在小尾寒羊中存在CR、TR和TW3種等位基因，在湖羊和多賽特中存在CR和TR兩種等位基因，而在特克塞爾中僅存在CR一種等位基因。TR

6、與CR相比在綿羊NPY基因編碼區(qū)第93 bp處發(fā)生了一個(gè)C→T的單堿基突變；TW與CR相比除發(fā)生C93T的單堿基突變外，還在130 bp和131 bp發(fā)生了GA→AT的雙堿基突變，該突變引起綿羊NPY成熟肽第16位氨基酸由天冬氨酸變?yōu)楫惲涟彼?。對于多態(tài)位點(diǎn)C/T，小尾寒羊3種基因型之間產(chǎn)羔數(shù)差異均不顯著(P＞0.05)。對于多態(tài)位點(diǎn)GA/AT，RW型小尾寒羊產(chǎn)羔數(shù)比RR型的多0.56只(P＜0.05)。在小尾寒羊這5種復(fù)合基因型中，TT