染料木黃酮對細胞光化學損傷的保護作用及其機制研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩54頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、目的:探討染料木黃酮對補骨脂素光化學療法(8-methoxypsoralenplus ultraviolet-A irradiation,PUVA)所致體外培養(yǎng)真皮成纖維細胞光化學損傷的保護作用,并研究其潛在的作用機制。
  方法:采用酶消化法分離、培養(yǎng)原代真皮成纖維細胞,傳代并擴增。以其特異性標記物波形蛋白(Vimentin)做免疫熒光鑒定。實驗分三組:正常對照組、光化學損傷組及染料木黃酮組。運用PUVA聯(lián)合構建體外培養(yǎng)真皮成纖

2、維細胞光化學損傷模型。噻唑藍比色法(MTT法)測定各組細胞增殖活性,確定染料木黃酮的最適光保護作用濃度,并繪制各組細胞連續(xù)10天的生長曲線。光鏡下觀察細胞形態(tài),酶組織化學法檢測細胞衰老β半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-Gal)的表達。流式細胞術檢測細胞周期及細胞內活性氧(Reactive oxygen species,ROS)含量,實時熒光定量PCR檢測細胞基質金屬蛋白酶(

3、Matrix metalloproteinases,MMPs)及雌激素受體β(Estrogen receptor-β) mRNA的表達。
  結果:酶消化法分離的真皮成纖維細胞經特異性標記物鑒定,陽性率達99%以上。在一定濃度范圍內,染料木黃酮的光保護作用呈劑量依賴性增強。UVA照射細胞后24 h,光化學損傷組絕大多數(shù)細胞由分裂表型轉化為無分裂活性表型(99.7±0.58)%,與正常對照組(7.7±1.15)%及染料木黃酮組(57

4、.7±3.51)%均有顯著性的差異(P<0.01);根據(jù)描繪的生長曲線顯示,正常對照組細胞呈現(xiàn)典型的“S”型曲線,光化學損傷組細胞呈一直線,幾乎無增長,而染料木黃酮組細胞雖有增殖,但在觀察期間未達到生長平臺期;正常對照組、光化學損傷組及染料木黃酮組SA-β-Gal陽性細胞率分別為(0.67±0.58)%、(96.67±1.53)%、(51.67±2.08)%,各組間具有統(tǒng)計學差異(P<0.01); PUVA能阻滯細胞于細胞周期的S期,染

5、料木黃酮則在一定程度上解除該阻滯,使細胞由S期進入G2/M期;光化學損傷組細胞內MMPs mRNA表達及ROS含量均較正常對照組明顯增高,染料木黃酮組則高于正常對照組而低于光化學損傷組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);染料木黃酮組細胞雌激素受體β(ER-β) mRNA表達較正常對照組及光化學損傷組明顯增高(P<0.01)。
  結論:適當濃度的染料木黃酮能在一定程度上保護PUVA所致真皮成纖維細胞光化學損傷作用,表現(xiàn)在細胞增殖

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論