“膚敏”提取物外用治療過(guò)敏性皮膚損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　 觀(guān)察中藥復(fù)方膚敏提取物外用對(duì)過(guò)敏性皮膚損傷的治療和修復(fù)作用，為詮釋該復(fù)方“祛腐生肌”之功效和應(yīng)用，拓展膚敏的給藥途徑及其研發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:
　　 1.用2，4-二硝基氯苯(DNCB)接觸豚鼠皮膚，使之產(chǎn)生過(guò)敏性反應(yīng)，12d后在豚鼠腹部皮膚上再次用DNCB攻擊，攻擊部位形成遲發(fā)型超敏反應(yīng)(DTH)，并伴有皮損現(xiàn)象。肉眼觀(guān)察皮損的愈合時(shí)間、形態(tài)及皮損愈合后取皮損部位皮膚做病理切片觀(guān)察皮損部

2、位表皮層、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及膠原的變化。在豚鼠背部皮膚涂抹高濃度DNCB致敏接觸的同時(shí)也造成皮膚組織凝固性壞死，從而建立化學(xué)性灼傷的皮損模型。肉眼觀(guān)察皮損的愈合時(shí)間、形態(tài)及愈合后皮膚病理切片皮損部位表皮層、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、充血、膠原、皮膚附屬器等的變化。
　　 2.將一定量的磷酸組胺溶液涂抹于動(dòng)物的破損皮膚表面可以引起動(dòng)物過(guò)敏性瘙癢。以每只豚鼠涂抹磷酸組胺的總用量(μg)為止癢閾值，以止癢閾值為指標(biāo)，觀(guān)察復(fù)方膚敏外涂的止癢作用。

3、>　　 3.每天給藥后30min距小鼠35cm處，用紫外燈照射3h，連續(xù)照射15d，造成小鼠皮損。測(cè)定皮膚中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量，病理切片觀(guān)察表皮、皮膚水腫及膠原變化。
　　 4.行兔耳增生性瘢痕模型手術(shù)。測(cè)量給藥第14d、21d、28d瘢痕的增生厚度，描繪給藥第0d、4d、8d、12d、16d時(shí)創(chuàng)面愈合面積，記錄愈合時(shí)間，計(jì)算瘢痕增生值、創(chuàng)面愈合率。給藥第14d、21d、28d隨機(jī)取皮損部位做病

4、理切片觀(guān)察表皮、表皮釘角、膠原排列等變化。
　　 5.把膚敏高、低劑量的溶液緊密接觸兔的完整皮膚和破損皮膚，觀(guān)察皮膚有無(wú)紅斑、水腫現(xiàn)象。
　　 結(jié)果:
　　 1.豚鼠DTH實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:膚敏能夠顯著縮短DTH致皮損的愈合時(shí)間。觀(guān)察期內(nèi)膚敏高、低劑量組較空白對(duì)照組皮損程度輕，皮膚愈合后較平整、完好。病理切片觀(guān)察發(fā)現(xiàn)空白對(duì)照組炎性癥狀明顯，鱗狀上皮部分基底細(xì)胞液化，表皮層局部有膿皰，真皮出血、充血、水腫，大量炎性細(xì)胞

5、浸潤(rùn)。膚敏高、低劑量組較空白對(duì)照組炎性癥狀減輕，無(wú)明顯充血及少量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，皮膚附屬器較明顯，膠原與正常皮膚接近。
　　 DNCB致豚鼠皮膚損傷實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:膚敏能顯著縮短灼傷皮膚愈合的時(shí)間。病理切片觀(guān)察，空白對(duì)照組真皮內(nèi)成纖維細(xì)胞增生明顯，真皮淺層充血明顯，局灶出血。膚敏高、低劑量組能減輕真皮層充血，減少成纖維細(xì)胞過(guò)度增生。
　　 2.磷酸組胺致豚鼠過(guò)敏性瘙癢的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與空白對(duì)照組比較膚敏高、低劑量組可使磷酸組

6、胺用量顯著增加(P<0.01)。
　　 3.紫外線(xiàn)致皮損的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與空白對(duì)照組比較，膚敏高、低劑量組能顯著提高皮膚SOD活力、降低MDA含量，差異有顯著性意義(P<0.01)。病理切片觀(guān)察發(fā)現(xiàn):空白對(duì)照組真皮層水腫，小血管擴(kuò)張充血，少許淋巴細(xì)胞散在侵潤(rùn)。膚敏高、低劑量組炎性癥狀明顯減輕，真皮層無(wú)水腫，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)少見(jiàn)。
　　 4.兔耳瘢痕模型實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與空白對(duì)照組相比，膚敏在第8d愈合效果顯著，在第4周抑制瘢痕

7、的增生效果顯著。病理觀(guān)察結(jié)果顯示，空白對(duì)照組，愈合初期潰瘍深，成纖維細(xì)胞增生，炎性滲出，角化過(guò)度伴角化不良，真皮層顯著充血；愈合后成纖維細(xì)胞及膠原增生明顯，毛細(xì)血管壁變薄，鱗狀上皮稍厚。膚敏在愈合階段能夠促進(jìn)成纖維細(xì)胞增生、表皮增厚，加快鱗狀上皮化，毛細(xì)血管基本不充血；在愈合后期成纖維細(xì)胞增生減少，毛細(xì)血管重建為小動(dòng)脈和小靜脈，表皮逐漸變薄與正常皮膚接近。
　　 5.皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，膚敏對(duì)兔完整皮膚和破損皮膚均無(wú)刺激性。