A型肉毒桿菌毒素對大鼠骨骼肌細胞凋亡影響的實驗研究.pdf

1、研究目的: 近年來BTXA注射后肌肉細胞微結構、功能的變化倍受關注。大量研究發(fā)現(xiàn)BTXA可誘導對多種組織細胞發(fā)生凋亡，并發(fā)現(xiàn)可通過影響骨骼肌肌蛋白轉錄因子(MyoD)的表達，從而使骨骼肌細胞發(fā)生細胞凋亡。但由于BTXA有化學去神經的作用，組織細胞失去神經支配后本身就可以造成肌肉萎縮，因此很難排除其化學失神經因素誘導的細胞凋亡機制干擾，無法觀察BTXA直接對骨骼肌細胞凋亡影響。針對于此本實驗設計特殊機械去神經+BTXA注射動物模型

2、，通過與單純機械去神經組比較，利用流式細胞儀PI法，和Annexin、PI雙染法，探討B(tài)TXA對肌細胞凋亡影響程度及bcl-2、和bax表達情況。為臨床更安全、有效地的使用BTXA提供理論依據(jù)。 研究方法: 36只成年雌性SD大鼠隨機分為4組(A，B，C，D)，生理鹽水對照組(A組)、單純離斷腓神經組(B組)、離斷腓神經+BTXA注射組(C組)、單純BTXA注射組(D組)。于術后2周后、4周、8周每組各處死動物3只，收集

3、雙側腓腸肌肌肉標本，采用流式細胞儀PI標記法和Annexin V、PI雙染法對大鼠腓腸肌成肌細胞的凋亡百分率進行檢測；采用免疫組化法檢測bcl-2、bax蛋白表達，并進行組間比較。 結論: 1．BTXA具有誘導骨骼肌細胞凋亡的作用，并使Bax蛋白表達增加，對Bcl-2表達無明顯影響，提示BTXA可能通過誘導骨骼肌細胞凋亡機制導致大鼠骨骼肌發(fā)生萎縮。 2．單純注射BTXA與機械去神經相比，同樣具有導致骨骼肌凋亡及肌