A型肉毒毒素對(duì)大鼠超長(zhǎng)軸型皮瓣成活影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:觀察A型肉毒毒素(botulinum toxin A，BTX-A)對(duì)大鼠超長(zhǎng)軸型皮瓣成活的影響，探討A型肉毒毒素藥物延遲的可行性及最佳注射位置。
　　方法:以30只雄性Wister大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。將大鼠隨機(jī)分為3組，分別為手術(shù)延遲組（A組），肉毒毒素組（B1皮瓣蒂部注射組，B2皮瓣遠(yuǎn)端注射組）和生理鹽水對(duì)照組（C1皮瓣蒂部注射組，C2皮瓣遠(yuǎn)端注射組），以一周為觀察期。腹腔注射水合氯醛0.5ml/100g麻醉動(dòng)物。皮瓣選取自大

2、鼠腹部，5cm×2cm大小，皮瓣遠(yuǎn)端跨越腹部中線2cm，該皮瓣選取包含腹部淺動(dòng)脈。第一步，手術(shù)延遲組沿術(shù)前設(shè)計(jì)畫線切開(kāi)上下端，皮瓣掀起至肉膜層，仔細(xì)操作，避免破壞肉膜層血管，徹底止血后原位縫合。肉毒毒素組B1以左側(cè)腹部淺動(dòng)脈為蒂，在皮瓣蒂部附近注射A型肉毒毒素(1ml，2.5U/ml)至皮下，對(duì)照組C1在該處注射生理鹽水。皮瓣遠(yuǎn)端注射組＆于腹部中線兩側(cè)旁開(kāi)1cm，將皮瓣劃分為上中下三等分，皮下注射A型肉毒毒素(1ml，2.5U/ml)，

3、對(duì)照組C2注射生理鹽水。第二步，一周后以左側(cè)為蒂掀起皮瓣，原位縫合。通過(guò)觀測(cè)各組皮瓣成活率（激光多普勒血流儀，照相圖像分析）、毛細(xì)血管密度、動(dòng)靜脈血管口徑、VEGF表達(dá)、CD31密度，比較各組間的差異。
　　結(jié)果：1. 大體觀察肉眼觀察成活皮瓣表現(xiàn)為質(zhì)地柔軟、紅潤(rùn)，針刺時(shí)出血;壞死的皮瓣質(zhì)硬、黑色，針刺時(shí)不出血;皮膚仝層未全部壞死的皮瓣表現(xiàn)鑒于前兩者之間。第二步操作后7天，與對(duì)照組相比較，A型肉毒毒素組和手術(shù)延遲組的皮瓣壞死面秋較

4、小，手術(shù)延遲組壞死最小，組織水腫較輕。
　　2. 皮瓣成活率檢測(cè)A型肉毒毒素組和手術(shù)延遲組皮瓣成活面積較大。A型肉毒毒素組B1成活面積為52.26±1.39％、B254.73±1.36％，手術(shù)延遲組成活率為58.56±0.82％。而對(duì)照組皮瓣成活率為C146.31±1.26％，C247.27％±1.43％。其中A型肉毒毒素皮瓣蒂部注射組皮瓣壞死面積相比皮瓣遠(yuǎn)端注射組壞死的面積較大。
　　3. 血管密度檢測(cè)肉毒毒素組和手術(shù)延遲

5、組血管密度增加，與空白對(duì)照組相比，密度增加較明顯，皮瓣蒂部注射組血管密度相比皮瓣遠(yuǎn)端注射組較少。
　　4. VEGF、CD31檢測(cè)免疫組織化學(xué)染色可見(jiàn)肉毒毒素組和手術(shù)延遲組中皮瓣分布較多的棕黃色顆粒，在皮瓣的表皮、真皮和毛囊汗腺的上皮細(xì)胞均有較強(qiáng)的陽(yáng)性表達(dá);而在對(duì)照組VEGF、CD31免疫陽(yáng)性細(xì)胞分布稀疏。皮瓣蒂部注射組棕黃色顆粒分布相比皮瓣遠(yuǎn)端注射組較稀疏。
　　5. 激光多普勒血流檢測(cè)結(jié)果與大體觀察結(jié)果相近，肉毒毒素注射

6、組和手術(shù)延遲組血流值較對(duì)照組高。
　　6. 動(dòng)靜脈血管口徑手術(shù)延遲組和肉毒毒素組動(dòng)靜脈口徑較生理鹽水對(duì)照組均較大，肉毒毒素延遲組的靜脈口徑較手術(shù)延遲組大。各組浸泡過(guò)腎上腺素鹽水的標(biāo)本中，肉毒毒素組的動(dòng)脈口徑較其他組大，靜脈口徑結(jié)果則無(wú)明顯差異。
　　結(jié)論:①結(jié)果表明A型肉毒毒素能通過(guò)抑制皮瓣微循環(huán)系統(tǒng)的交感神經(jīng)，對(duì)皮瓣遠(yuǎn)端缺血有一定的保護(hù)作用，促進(jìn)其成活;②皮瓣遠(yuǎn)端注射A型肉毒毒素增加皮瓣成活的長(zhǎng)度;③皮瓣蒂部注射A型肉毒毒