A型肉毒毒素對大鼠超長軸型皮瓣成活影響的實驗研究.pdf

1、目的:觀察A型肉毒毒素(botulinum toxin A，BTX-A)對大鼠超長軸型皮瓣成活的影響，探討A型肉毒毒素藥物延遲的可行性及最佳注射位置。
　　方法:以30只雄性Wister大鼠為實驗對象。將大鼠隨機分為3組，分別為手術(shù)延遲組（A組），肉毒毒素組（B1皮瓣蒂部注射組，B2皮瓣遠端注射組）和生理鹽水對照組（C1皮瓣蒂部注射組，C2皮瓣遠端注射組），以一周為觀察期。腹腔注射水合氯醛0.5ml/100g麻醉動物。皮瓣選取自大

2、鼠腹部，5cm×2cm大小，皮瓣遠端跨越腹部中線2cm，該皮瓣選取包含腹部淺動脈。第一步，手術(shù)延遲組沿術(shù)前設(shè)計畫線切開上下端，皮瓣掀起至肉膜層，仔細操作，避免破壞肉膜層血管，徹底止血后原位縫合。肉毒毒素組B1以左側(cè)腹部淺動脈為蒂，在皮瓣蒂部附近注射A型肉毒毒素(1ml，2.5U/ml)至皮下，對照組C1在該處注射生理鹽水。皮瓣遠端注射組＆于腹部中線兩側(cè)旁開1cm，將皮瓣劃分為上中下三等分，皮下注射A型肉毒毒素(1ml，2.5U/ml)，

3、對照組C2注射生理鹽水。第二步，一周后以左側(cè)為蒂掀起皮瓣，原位縫合。通過觀測各組皮瓣成活率（激光多普勒血流儀，照相圖像分析）、毛細血管密度、動靜脈血管口徑、VEGF表達、CD31密度，比較各組間的差異。
　　結(jié)果：1. 大體觀察肉眼觀察成活皮瓣表現(xiàn)為質(zhì)地柔軟、紅潤，針刺時出血;壞死的皮瓣質(zhì)硬、黑色，針刺時不出血;皮膚仝層未全部壞死的皮瓣表現(xiàn)鑒于前兩者之間。第二步操作后7天，與對照組相比較，A型肉毒毒素組和手術(shù)延遲組的皮瓣壞死面秋較

4、小，手術(shù)延遲組壞死最小，組織水腫較輕。
　　2. 皮瓣成活率檢測A型肉毒毒素組和手術(shù)延遲組皮瓣成活面積較大。A型肉毒毒素組B1成活面積為52.26±1.39％、B254.73±1.36％，手術(shù)延遲組成活率為58.56±0.82％。而對照組皮瓣成活率為C146.31±1.26％，C247.27％±1.43％。其中A型肉毒毒素皮瓣蒂部注射組皮瓣壞死面積相比皮瓣遠端注射組壞死的面積較大。
　　3. 血管密度檢測肉毒毒素組和手術(shù)延遲

5、組血管密度增加，與空白對照組相比，密度增加較明顯，皮瓣蒂部注射組血管密度相比皮瓣遠端注射組較少。
　　4. VEGF、CD31檢測免疫組織化學(xué)染色可見肉毒毒素組和手術(shù)延遲組中皮瓣分布較多的棕黃色顆粒，在皮瓣的表皮、真皮和毛囊汗腺的上皮細胞均有較強的陽性表達;而在對照組VEGF、CD31免疫陽性細胞分布稀疏。皮瓣蒂部注射組棕黃色顆粒分布相比皮瓣遠端注射組較稀疏。
　　5. 激光多普勒血流檢測結(jié)果與大體觀察結(jié)果相近，肉毒毒素注射

6、組和手術(shù)延遲組血流值較對照組高。
　　6. 動靜脈血管口徑手術(shù)延遲組和肉毒毒素組動靜脈口徑較生理鹽水對照組均較大，肉毒毒素延遲組的靜脈口徑較手術(shù)延遲組大。各組浸泡過腎上腺素鹽水的標本中，肉毒毒素組的動脈口徑較其他組大，靜脈口徑結(jié)果則無明顯差異。
　　結(jié)論:①結(jié)果表明A型肉毒毒素能通過抑制皮瓣微循環(huán)系統(tǒng)的交感神經(jīng)，對皮瓣遠端缺血有一定的保護作用，促進其成活;②皮瓣遠端注射A型肉毒毒素增加皮瓣成活的長度;③皮瓣蒂部注射A型肉毒毒