吡格列酮對(duì)高糖高胰島素誘導(dǎo)的肥大心肌細(xì)胞抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：高糖高胰島素血癥是2型糖尿病的重要特征，近年來(lái)它們?cè)谔悄虿〔l(fā)心肌肥大過(guò)程中的作用逐漸得到證實(shí)，而新型噻唑烷二酮類(lèi)口服降糖藥-吡格列酮對(duì)心肌肥大有明顯的治療作用，但其作用機(jī)制尚不清楚。心肌營(yíng)養(yǎng)素-1(cardiotrophin-1，CT-1)是IL-6家族中一種具有強(qiáng)大致心肌肥大作用的因子，因而，我們?cè)O(shè)計(jì)了本實(shí)驗(yàn)觀察心肌營(yíng)養(yǎng)素-1在高糖高胰島素誘導(dǎo)的肥大心肌細(xì)胞中的表達(dá)，以及吡格列酮對(duì)其表達(dá)的影響，以探討心肌營(yíng)養(yǎng)素-1在糖尿病心肌

2、肥大發(fā)生中的作用和吡格列酮治療的作用途徑。 方法：體外原代培養(yǎng)新生大鼠心肌細(xì)胞，并經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定。然后將培養(yǎng)的新生大鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)分為四組：正常對(duì)照組，模型組，模型治療組，給去甲腎上腺素的陽(yáng)性對(duì)照組。給藥后分別檢測(cè)各組心肌細(xì)胞肥大的指標(biāo)：用圖像分析儀測(cè)定心肌細(xì)胞的表面積，用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定心肌細(xì)胞蛋白含量，用半定量RT-PCR法檢測(cè)肥大心肌細(xì)胞的特征性基因-心房利鈉因子mRNA的表達(dá)。同時(shí)用半定量RT-PCR法檢測(cè)心肌營(yíng)養(yǎng)

3、素-1 mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：1.心肌細(xì)胞表面積：模型組心肌細(xì)胞表面積顯著高于正常對(duì)照組，增加了28％(P<0.01)，而吡格列酮治療組心肌細(xì)胞的表面積降低了9％(P<0.01)。此外，陽(yáng)性對(duì)照組的心肌細(xì)胞表面積較對(duì)照組也顯著增大，增加了34％(P<0.01)。2.心肌細(xì)胞的蛋白含量：處理因素作用48h后，測(cè)定各組心肌細(xì)胞的蛋白含量。與正常對(duì)照組相比，模型組和陽(yáng)性對(duì)照組心肌細(xì)胞總蛋白含量均顯著升高(P<0.01)，而治療組相對(duì)

4、于肥大組顯著降低(P<0.05)。3.ANF mRNA表達(dá)：半定量RT-PCR分析表明，模型組和陽(yáng)性對(duì)照組的ANF mRNA表達(dá)相對(duì)于正常對(duì)照組顯著升高(P<0.01)，而吡格列酮治療組較模型組顯著降低(P<0.01)。4.CT-1mRNA表達(dá)：半定量RT-PCR結(jié)果顯示，模型組和陽(yáng)性對(duì)照組的CT-1mRNA表達(dá)相對(duì)于正常對(duì)照組顯著升高(P<0.01)，而吡格列酮治療組較模型組顯著降低(P<0.05)。 結(jié)論：高糖高胰島素誘導(dǎo)的