三氧化二砷聯(lián)合阿霉素對(duì)淋巴瘤細(xì)胞增殖及凋亡的影響.pdf

1、非霍奇金淋巴瘤(NHL)是一種起源于淋巴組織的異質(zhì)性惡性腫瘤。目前臨床應(yīng)用最廣泛的治療方法是以蒽環(huán)類為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療，這些化療方案對(duì)淋巴瘤患者的總體生存率雖有所改善，但大多數(shù)患者的治療效果較差，緩解持續(xù)時(shí)間短，且毒副反應(yīng)大，患者不能耐受。體外及動(dòng)物試驗(yàn)證明三氧化二砷(As2O3)具有明顯的抗淋巴瘤作用，其作用機(jī)制涉及抑制腫瘤細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等，其毒副作用小，并與常規(guī)化療藥物無交叉耐藥性。國(guó)內(nèi)外基礎(chǔ)研究顯示As2O3體外單藥及聯(lián)

2、合其他藥物等均可以抑制多種惡性淋巴瘤細(xì)胞株的增殖。 本實(shí)驗(yàn)從細(xì)胞生長(zhǎng)增殖、凋亡及凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)等細(xì)胞生物學(xué)行為的角度，探討AS2O3聯(lián)合阿霉素(ADM)對(duì)淋巴瘤細(xì)胞株Raji細(xì)胞的影響，為臨床尋找新的治療藥物和聯(lián)合化療方案提供理論依據(jù)。我們采用Wright-Giemsa染色法觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化；MTT法分析As2O3聯(lián)合ADM對(duì)淋巴瘤細(xì)胞增殖抑制作用；采用FCM分析兩藥聯(lián)合對(duì)細(xì)胞凋亡的影響及As2O3對(duì)細(xì)胞內(nèi)ADM熒光強(qiáng)

3、度影響；用半定量RT-PCR分析細(xì)胞內(nèi)突變型p53的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，AS2O3聯(lián)合ADM作用細(xì)胞24h后，可觀察到細(xì)胞出現(xiàn)凋亡形態(tài)學(xué)改變。與AS2O3或ADM單藥組相比，AS2O3與ADM聯(lián)合用藥可增強(qiáng)對(duì)Raji細(xì)胞的增殖抑制率，其作用呈濃度和時(shí)間依賴性(P<0.05)。并且AS2O3與ADM聯(lián)合組與單藥組相比，Raji細(xì)胞的凋亡率具有顯著性差異(P<0.05)。同時(shí)單藥組、聯(lián)合組中突變型p53的表達(dá)水平低于對(duì)照組(P<0.05)。

4、另外加入1 μmol/L、2 μmol/L As2O3后細(xì)胞內(nèi)ADM的熒光強(qiáng)度分別為18.53和18.12，分別增加0.056倍和0.023倍，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析無明顯差異(P>0.05)。 綜上所述，As2O3、ADM單藥及兩種藥物的聯(lián)合體外均可抑制淋巴瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)凋亡和下調(diào)突變型p53；As2O3和ADM聯(lián)合體外有協(xié)同抗淋巴瘤作用；As2O3對(duì)Raji細(xì)胞內(nèi)ADM濃度無顯著影響；As2O3可增強(qiáng)淋巴瘤細(xì)胞的化療敏感性，其下調(diào)突