漢坦病毒的體外抑制實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分:目的:建立漢坦病毒體外細(xì)胞培養(yǎng)及鑒定的方法.方法:用漢坦病毒76-118標(biāo)準(zhǔn)株接種于細(xì)胞貼壁培養(yǎng)法傳代培養(yǎng)的Vero-E6細(xì)胞中,連續(xù)傳代培養(yǎng)8-10天后,采用免疫熒光法鑒定細(xì)胞中的病毒抗原.結(jié)果:用漢坦病毒76-118標(biāo)準(zhǔn)株感染傳代培養(yǎng)的Vero-E6細(xì)胞,第4天50％的Vero-E6細(xì)胞胞漿中可見針對(duì)漢坦病毒的特異性免疫熒光,第7天陽性細(xì)胞可達(dá)100％.結(jié)論:采用細(xì)胞貼壁法培養(yǎng)的Vero-E6細(xì)胞,接種漢坦病毒后,經(jīng)胰酶消

2、化傳代培養(yǎng),細(xì)胞生長狀態(tài)良好,可作為腎綜合征出血熱體外研究的細(xì)胞模型.第二部分:目的:探討利巴韋林等五種藥物對(duì)漢坦病毒的體外抑制作用.方法:利用漢坦病毒76-118株感染傳代培養(yǎng)的Vero-E6細(xì)胞,采用免疫熒光法分別評(píng)價(jià)五種藥物的抗病毒效果.結(jié)果:(1)五種藥物均對(duì)漢坦病毒的入侵無阻斷作用;(2)免疫熒光檢測利巴韋林對(duì)漢坦病毒增殖有明顯的抑制作用,其最大無毒濃度(TD0)為500ug/ml、最小有效濃度(MTC)為31.2ug/ml,