缺血-缺氧對心臟胰島素樣生長因子2受體表達調控的實驗研究.pdf

1、盡管心血管疾病的治療方法現(xiàn)已取得了巨大的進展，但是各種心臟疾病導致的心力衰竭在全球仍然具有很高的發(fā)病率和死亡率。心力衰竭是一種由多因素引起的疾病，內在的分子機制還不是很清楚，但很可能與潛在的基因和蛋白質表達改變有關。本實驗室已經(jīng)證明胰島素樣生長因子2受體（insulin-like growth factor2receptor，IGF-2R）在心衰患者心臟組織的表達顯著提高，提示IGF-2R可能在心力衰竭的發(fā)生中起重要的作用。本實驗檢測了

2、IGF-2R在大鼠心肌梗死不同時間點后的動態(tài)變化規(guī)律，并在體外以缺氧無血清模擬心肌缺血缺氧環(huán)境，研究IGF-2R在心肌細胞缺氧無血清時表達的變化以及其與細胞凋亡的關系，為闡明IGF-2R在心肌梗死后心力衰竭發(fā)生發(fā)展過程中的作用奠定基礎。
　　 本論文主要包括以下研究內容：
　　 1雄性SD大鼠180只隨機分為兩組：心肌梗死模型組和假手術對照組。通過結扎大鼠左冠狀動脈前降支制作大鼠心梗模型，梗死后1天、3天、7天、2周、4

3、周和8周取大鼠左心室組織，采用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbentassay，ELISA）檢測大鼠心肌梗死區(qū)IGF-2R的表達變化規(guī)律。結果表明，大鼠心肌梗死后1天、3天IGF-2R表達下降，隨后逐漸恢復至正常。
　　 2體外模擬心肌缺血缺氧環(huán)境，觀察IGF-2R在心肌細胞缺氧無血清時表達的變化。離體培養(yǎng)SD乳鼠心肌細胞，缺氧無血清處理不同時間點后收獲細胞，應用反轉錄聚合酶鏈式反應（RT-PCR

4、）和實時定量RT-PCR（real time RT-PCR）測定IGF-2RmRNA水平的表達變化，并進一步應用ELISA方法檢測IGF-2R在蛋白水平的改變。與對照組相比，IGF-2R mRNA在缺氧無血清處理12h和24h后表達顯著增高，缺氧無血清24h后IGF-2R蛋白表達也升高。
　　 3采用脂質體介導siRNA轉染心肌細胞抑制IGF-2R mRNA的表達后，采用流式細胞儀檢測IGF-2R對缺氧無血清引起的心肌細胞凋亡的