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文檔簡介
1、目的：肝癌是迅速發(fā)展致死的一種惡性腫瘤，我國是世界上肝癌發(fā)病率最高的國家之一。近年來隨著影像診斷學的發(fā)展，一些重要的診斷手段如B超、CT、AFP等腫瘤標記物引入臨床應用，早期肝癌的診斷率得到提高。人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶作為端粒酶的限速酶，具有腫瘤特異性，已成為腫瘤治療和診斷的重要靶點。本課題應用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)半定量檢測HCC(hepatocellularcarcinoma)患者肝細胞性肝癌組織中端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶mRNA(h
2、TERTmRNA)的表達，探討hTERTmRNA在肝細胞性肝癌組織中的表達及其臨床意義。 方法：在肝癌手術切除17例標本中分別切取10g肝癌組織，液氮凍存。以肝癌細胞株BEL7405為陽性對照，以3例肝囊腫切除邊緣部分正常肝組織為陰性對照。按一步法應用TaKaRaRNAisoReagent提取總RNA，紫外分光光度計確定核酸純度，并定量。采取兩步法RT-PCR檢測hTERTmRNA的表達水平，選用三磷酸甘油醛脫氫酶(humang
3、lyceraldehydes-3-phoshatedehydrogenase，hGAPDH)基因作為原始序列的內(nèi)參照，分析hTERTmRNA在肝癌中的表達及其臨床意義。 結果：hTERTmRNA基因在肝癌細胞株BEL7405及82.35％的肝細胞性肝癌組織中表達，正常肝組織內(nèi)未檢測到hTERTmRNA。肝細胞性肝癌組織hTERTmRNA表達明顯高于正常肝組織。肝癌組織、肝癌細胞株與正常肝組織GAPDH表達無差異。hTERTmRN
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