hTERT mRNA在肝細(xì)胞性肝癌中的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的：肝癌是迅速發(fā)展致死的一種惡性腫瘤，我國(guó)是世界上肝癌發(fā)病率最高的國(guó)家之一。近年來(lái)隨著影像診斷學(xué)的發(fā)展，一些重要的診斷手段如B超、CT、AFP等腫瘤標(biāo)記物引入臨床應(yīng)用，早期肝癌的診斷率得到提高。人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶作為端粒酶的限速酶，具有腫瘤特異性，已成為腫瘤治療和診斷的重要靶點(diǎn)。本課題應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)半定量檢測(cè)HCC(hepatocellularcarcinoma)患者肝細(xì)胞性肝癌組織中端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶mRNA(h

2、TERTmRNA)的表達(dá)，探討hTERTmRNA在肝細(xì)胞性肝癌組織中的表達(dá)及其臨床意義。 方法：在肝癌手術(shù)切除17例標(biāo)本中分別切取10g肝癌組織，液氮凍存。以肝癌細(xì)胞株BEL7405為陽(yáng)性對(duì)照，以3例肝囊腫切除邊緣部分正常肝組織為陰性對(duì)照。按一步法應(yīng)用TaKaRaRNAisoReagent提取總RNA，紫外分光光度計(jì)確定核酸純度，并定量。采取兩步法RT-PCR檢測(cè)hTERTmRNA的表達(dá)水平，選用三磷酸甘油醛脫氫酶(humang

3、lyceraldehydes-3-phoshatedehydrogenase，hGAPDH)基因作為原始序列的內(nèi)參照，分析hTERTmRNA在肝癌中的表達(dá)及其臨床意義。 結(jié)果：hTERTmRNA基因在肝癌細(xì)胞株BEL7405及82.35％的肝細(xì)胞性肝癌組織中表達(dá)，正常肝組織內(nèi)未檢測(cè)到hTERTmRNA。肝細(xì)胞性肝癌組織hTERTmRNA表達(dá)明顯高于正常肝組織。肝癌組織、肝癌細(xì)胞株與正常肝組織GAPDH表達(dá)無(wú)差異。hTERTmRN