

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文檔簡介
1、目的:探討DNA雙鏈斷裂修復(fù)途徑中關(guān)鍵蛋白CtIP在人肝癌組織中的表達(dá)情況,同時(shí)結(jié)合臨床特征分析其在肝癌發(fā)生發(fā)展中的意義。
方法:
1.應(yīng)用免疫組化親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物(SABC)三步法技術(shù)檢測60例肝癌組織及其對(duì)應(yīng)的癌旁組織中CtIP蛋白的表達(dá)水平。
2.應(yīng)用Western-blot蛋白印跡實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測上述2種組織的CtIP蛋白的表達(dá)水平。
3.應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-ti
2、me PCR)技術(shù)檢測上述60例肝癌患者的肝癌組織和相應(yīng)癌旁組織中CtIP mRNA的表達(dá)水平。
4.分析CtIP蛋白表達(dá)水平與肝癌臨床特征之間的關(guān)系。
結(jié)果:
1.免疫組化實(shí)驗(yàn)顯示CtIP蛋白陽性染色定位于細(xì)胞胞核和胞質(zhì),主要位于細(xì)胞胞核中,肝癌細(xì)胞中染色呈棕黃色粗大的團(tuán)塊狀或顆粒狀,癌旁組織陽性染色明顯弱于肝癌組織,呈淡棕色。間質(zhì)細(xì)胞未見明顯陽性染色。60例肝癌組織中有38例CtIP蛋白表達(dá)陽性,陽性率
3、為63.3%;對(duì)應(yīng)的癌旁組織中有15例表達(dá)陽性,陽性率為25.0%,兩者間具有顯著性差異(p<0.05)。
2.Western-blot實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)120KDa處有一特異性條帶,肝癌組織中CtIP蛋白表達(dá)條帶的深度明顯高于癌旁組織,測定灰度值并定量分析結(jié)果顯示,肝癌組織CtIP蛋白相對(duì)表達(dá)量高于癌旁組織,兩者間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),與免疫組織結(jié)果一致。
3.60例肝癌及對(duì)應(yīng)癌旁組織標(biāo)本中,肝癌組織CtIP蛋白
4、mRNA相對(duì)表達(dá)量明顯高于癌旁組織,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
4.分析CtIP蛋白的表達(dá)與肝癌的臨床特征的關(guān)系發(fā)現(xiàn):CtIP蛋白表達(dá)水平與患者有無包膜和肝內(nèi)、淋巴結(jié)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)(p﹤0.05),而與性別、腫瘤直徑大小和Edmondson分級(jí)無關(guān)(p﹥0.05)。
結(jié)論:CtIP蛋白及其mRNA在肝癌組織中的表達(dá)水平顯著高于相應(yīng)癌旁組織,這種表達(dá)異常可能與人類肝癌的發(fā)生和轉(zhuǎn)移有關(guān),對(duì)臨床診斷和治療有一定
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