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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過(guò)研究消瘤保肺丸含藥血清對(duì)E-cadherin、α-catenin及β-catenin在人肺癌PG細(xì)胞株中干預(yù)的表達(dá)情況,以揭示該藥對(duì)肺癌細(xì)胞粘附分子的影響及意義。
方法:實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為四組,即消瘤保肺丸高劑量組、低劑量組、對(duì)照組、空白組。每組2只日本大耳白兔。消瘤保肺丸高、低劑量組給予不同劑量的消瘤保肺丸,對(duì)照組給予清肺化痰丸,空白組給予生理鹽水,每天每只白兔予灌胃給藥2次,每次10ml/kg,連續(xù)給藥3日,分別提取動(dòng)
2、物血清制備培養(yǎng)基。用含藥血清制成20%培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞,采用免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶法檢測(cè)E-cadherin、α-catenin及β-catenin在各組的表達(dá)情況,并計(jì)算陽(yáng)性表達(dá)例數(shù);不同藥物對(duì)PG細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)48h,用RT-PCR法提取PG細(xì)胞DNA,并分析3種分子電泳條帶的灰度值。
結(jié)果:(1)IHC實(shí)驗(yàn)中,E-cadherin、α-catenin及β-catenin在消瘤保肺丸高、低劑量組的表達(dá)均與空白組
3、差異顯著,P<0.01。E-cadherin在消瘤保肺丸的藥物影響下陽(yáng)性表達(dá)率較高,均高于對(duì)照組和空白組,P<0.01;而α-catenin與β-catenin在消瘤保肺丸干預(yù)作用下陽(yáng)性表達(dá)率較低,且均低于對(duì)照組和空白組,P<0.01。(2)RT-PCR實(shí)驗(yàn)中,消瘤保肺丸高劑量組對(duì)3種分子的表達(dá)與空白組差異顯著,P<0.01。α-catenin、β-catenin在消瘤保肺丸低劑量組的表達(dá)與空白組有差異,P<0.05;E-cadheri
4、n表達(dá)與空白組無(wú)顯著差異,P>0.05。α-catenin在對(duì)照組的表達(dá)與空白組有差異,P<0.05。
結(jié)論:E-cadherin、α-catenin及β-catenin的表達(dá)與肺癌的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移密切相關(guān),其中E-cadherin與肺癌細(xì)胞的侵襲性、轉(zhuǎn)移性呈負(fù)相關(guān);α-catenin及β-catenin的表達(dá)與其相反,說(shuō)明此兩種分子與肺癌細(xì)胞的侵襲性、轉(zhuǎn)移性正相關(guān)。消瘤保肺丸通過(guò)對(duì)粘附分子的干預(yù)作用影響肺癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程,
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