補(bǔ)骨脂及雙氫青蒿素對(duì)隱孢子蟲(chóng)感染小鼠抗原呈遞細(xì)胞功能調(diào)節(jié)作用的觀察.pdf

1、背景：隱孢子蟲(chóng)（Cryptosporidium）是一類(lèi)機(jī)會(huì)致病性寄生蟲(chóng)，主要引起包括人類(lèi)在內(nèi)的多種脊椎動(dòng)物發(fā)生隱孢子蟲(chóng)病（cryptosporidiosis），給人類(lèi)的健康帶來(lái)嚴(yán)重的危害。隱孢子蟲(chóng)呈全球性分布，種類(lèi)較多。其中與人類(lèi)致病有密切關(guān)系的蟲(chóng)種主要有兩種：①人隱孢子蟲(chóng)（Cryptosporidium hominis，C．hominis），主要在人群中廣泛傳播，引起人類(lèi)隱孢子蟲(chóng)?。虎谛∏螂[孢子蟲(chóng)（Cryptosporidium pa

2、rvum，C．parvum），它是一種人獸共患寄生蟲(chóng)，除引起人類(lèi)疾病外，還能感染多種哺乳動(dòng)物導(dǎo)致其身體損害。 以往研究表明，隱孢子蟲(chóng)感染（?。┑某掷m(xù)時(shí)間及發(fā)病程度取決于宿主免疫狀況。在隱孢子蟲(chóng)感染以及致病過(guò)程中，宿主細(xì)胞免疫及體液免疫對(duì)抵抗本蟲(chóng)感染起重要作用。其中，CD4+T細(xì)胞和IFN-γ在清除感染、消除炎癥反應(yīng)過(guò)程發(fā)揮了至關(guān)重要的作用。大量研究提示我們可以通過(guò)抑殺原蟲(chóng)和提高宿主免疫力這兩條途徑來(lái)控制和消除隱孢子蟲(chóng)感染。

3、 近20年來(lái)，國(guó)內(nèi)外研究雖然在隱孢子蟲(chóng)的病原學(xué)、分子生物學(xué)及綜合防治技術(shù)等方面取得了一定的成果，但對(duì)在隱孢子蟲(chóng)病感染免疫以及藥物治療等方面研究較少。迄今為止，人類(lèi)尚未開(kāi)發(fā)出理想的抑殺隱孢子蟲(chóng)的藥物。 目的：本文通過(guò)對(duì)中藥補(bǔ)骨脂、雙氫青蒿素和兩種藥物配伍分別治療隱孢子蟲(chóng)感染的小鼠。觀察治療前后，各組小鼠免疫相關(guān)指標(biāo)的變化情況，進(jìn)而分析和探討我國(guó)傳統(tǒng)中藥的殺蟲(chóng)作用，及其對(duì)宿主腸道免疫系統(tǒng)中抗原呈遞細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用，從而為隱孢子蟲(chóng)

4、感染（病）的免疫防治提供新的思路和方法。 材料與方法：將60只昆明小鼠隨機(jī)分成五組：陽(yáng)性對(duì)照組（B組）、雙氫青蒿素治療組（C組）、補(bǔ)骨脂治療組（D組）和二者配伍治療組（E組），正常對(duì)照組（A組）。并按治療時(shí)間的不同，將每組分成1周治療組（C1、D1、E1）、2周治療組（C2、D2、E2）和陽(yáng)性對(duì)照組（B1、B2），同時(shí)設(shè)A1和A2二個(gè)正常對(duì)照組。將B、C、D、E組的48只昆明小鼠經(jīng)腹股溝皮下注射地塞米松磷酸鈉注射液，隱孢子蟲(chóng)感染

5、模型建立成功后，進(jìn)行中藥治療。每組治療結(jié)束后，觀察糞便卵囊排出量、測(cè)量小鼠外周血中IL-12p70含量，進(jìn)行組織病理學(xué)與電鏡超微結(jié)構(gòu)觀察。同時(shí)，檢測(cè)回腸中MHC-Ⅱ類(lèi)抗原的表達(dá)情況。所得數(shù)據(jù)用x±S表示，用SPSS10．0統(tǒng)計(jì)軟件，各組間進(jìn)行單因素方差分析，用P表示。 結(jié)果：所有藥物治療組，糞便卵囊量與陽(yáng)性對(duì)照組相比均明顯減少（P<0．01），小鼠腸壁組織病變得以修復(fù)。在經(jīng)藥物治療1周后，C1組MHC-Ⅱ類(lèi)抗原的表達(dá)顯著高于A1

6、組和E1組（P<0．05）；C1與D1血清IL-12p70的含量明顯高于A1、B1、E1，C1明顯高于D1 （P<0．01）。治療2周后，C2、D2、E2組MHC-Ⅱ類(lèi)抗原的表達(dá)與正常對(duì)照組A2組無(wú)差別，但明顯高于陽(yáng)性對(duì)照組（P<0．05）；C2與D2組的IL-12p70水平明顯高于A2、B2、E2，而且C2明顯高于D2 （P<0．01）。 結(jié)論： 1、中藥補(bǔ)骨脂、雙氫青蒿素以及二者合劑配伍均可通過(guò)提高抗原呈遞細(xì)胞的活性

7、，使MHC-Ⅱ類(lèi)抗原的表達(dá)增強(qiáng)，提高血清中IL-12p70的含量，進(jìn)而增強(qiáng)機(jī)體對(duì)隱孢子蟲(chóng)感染的免疫應(yīng)答反應(yīng)，清除原蟲(chóng)感染，以達(dá)到治療隱孢子蟲(chóng)感染的目的。 2、三個(gè)實(shí)驗(yàn)組中，雙氫青蒿素抑殺蟲(chóng)體的效果最為明顯。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)雙氫青蒿素對(duì)抗原呈遞細(xì)胞的效果作用最強(qiáng)，誘導(dǎo)血清IL-12p70含量提高最明顯，可以有效防治小鼠隱孢子蟲(chóng)感染。 3、隱孢子蟲(chóng)在宿主腸黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)寄生過(guò)程中，可能抑制或損害抗原呈遞細(xì)胞對(duì)外源性抗原的應(yīng)答能力，導(dǎo)