瑞香狼毒結(jié)合熱療對(duì)胃癌的抗腫瘤作用研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文瑞香狼毒結(jié)合熱療對(duì)胃癌的抗腫瘤作用研究姓名：李旺申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：中西醫(yī)結(jié)合臨床指導(dǎo)教師：方朝義;戴潔20030301中文摘要活細(xì)胞拒染 試驗(yàn) 將指數(shù)生長(zhǎng)期的 人胃 腺癌 B G C - 8 2 3 細(xì)胞用含 1 0 % 小牛血清的 R P M I - 1 6 4 0培養(yǎng)液調(diào)配為 5 X1 0 4 / m l 的細(xì)胞懸液， 接種在2 塊2 4 孔培養(yǎng)板上， 在3 7 0 C5 % C O Z 溫箱中 培養(yǎng)2

2、 4 h ， 使細(xì)胞貼 壁生 長(zhǎng)。 將中 藥瑞香 狼毒水提液 ( S C L ) 用完全培養(yǎng)液將其稀釋為 1 , 2 , 5 , 1 0 ,2 0 m g / m l 。 取出 培 養(yǎng)板， 在超 凈 工 作臺(tái) 中， 吸出舊 培 養(yǎng) 液后分別加入不 同濃度 的 S C L ;對(duì)照組加入 等量 的R P MI - 1 6 4 0 ，每組設(shè) 3 個(gè)平行樣本， 板 工( 無(wú)熱處理組)放回 培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng); 板1 1( 熱處理組) 放入 4

3、 3 ℃ 恒溫 水浴箱加熱 1 2 0 m i n 后放回 培養(yǎng)箱培 養(yǎng)。 2 4 h 后加0 . 4 % 臺(tái)盼 藍(lán)染液， 計(jì)數(shù)不 染色的 活細(xì)胞， 實(shí) 驗(yàn)重復(fù)3 次。 計(jì)算相對(duì)抑制率。克隆形成試驗(yàn) 將指數(shù)生長(zhǎng)期 B G C - 8 2 3 細(xì)胞用含 1 0 % 小牛血清的 R P MI - 1 6 4 0培養(yǎng)液稀釋成 3 0 0個(gè)/ m l 的細(xì)胞懸液。 加入到6 孔培 養(yǎng)板 ( 5 m l / 孔) 上， 置c o : 培養(yǎng)箱中 培

4、養(yǎng) 2 4 h ， 吸出 培養(yǎng)液， 加入完全培養(yǎng)液稀釋好的不同 濃度S C L ( 5 m 1 / 孔) ， 每組 3 孔， 對(duì)照組加入含 1 0 % 小牛血清的R P M I - 1 6 4 0 培養(yǎng)液。 無(wú)熱處理 組放回 培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。中藥結(jié)合熱處理組放入 4 3 ℃ 恒溫水浴箱中 加熱 1 2 0 m i n o兩組均在3 7 0 C 5 % C 0 2 溫箱中 靜置1 0 天( 中間換含有S C L完全培養(yǎng)液 1 次)