瑞香狼毒結合熱療對胃癌的抗腫瘤作用研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文瑞香狼毒結合熱療對胃癌的抗腫瘤作用研究姓名：李旺申請學位級別：碩士專業(yè)：中西醫(yī)結合臨床指導教師：方朝義;戴潔20030301中文摘要活細胞拒染 試驗 將指數(shù)生長期的 人胃 腺癌 B G C - 8 2 3 細胞用含 1 0 % 小牛血清的 R P M I - 1 6 4 0培養(yǎng)液調(diào)配為 5 X1 0 4 / m l 的細胞懸液， 接種在2 塊2 4 孔培養(yǎng)板上， 在3 7 0 C5 % C O Z 溫箱中 培養(yǎng)2

2、 4 h ， 使細胞貼 壁生 長。 將中 藥瑞香 狼毒水提液 ( S C L ) 用完全培養(yǎng)液將其稀釋為 1 , 2 , 5 , 1 0 ,2 0 m g / m l 。 取出 培 養(yǎng)板， 在超 凈 工 作臺 中， 吸出舊 培 養(yǎng) 液后分別加入不 同濃度 的 S C L ;對照組加入 等量 的R P MI - 1 6 4 0 ，每組設 3 個平行樣本， 板 工( 無熱處理組)放回 培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng); 板1 1( 熱處理組) 放入 4

3、 3 ℃ 恒溫 水浴箱加熱 1 2 0 m i n 后放回 培養(yǎng)箱培 養(yǎng)。 2 4 h 后加0 . 4 % 臺盼 藍染液， 計數(shù)不 染色的 活細胞， 實 驗重復3 次。 計算相對抑制率?？寺⌒纬稍囼?將指數(shù)生長期 B G C - 8 2 3 細胞用含 1 0 % 小牛血清的 R P MI - 1 6 4 0培養(yǎng)液稀釋成 3 0 0個/ m l 的細胞懸液。 加入到6 孔培 養(yǎng)板 ( 5 m l / 孔) 上， 置c o : 培養(yǎng)箱中 培

4、養(yǎng) 2 4 h ， 吸出 培養(yǎng)液， 加入完全培養(yǎng)液稀釋好的不同 濃度S C L ( 5 m 1 / 孔) ， 每組 3 孔， 對照組加入含 1 0 % 小牛血清的R P M I - 1 6 4 0 培養(yǎng)液。 無熱處理 組放回 培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。中藥結合熱處理組放入 4 3 ℃ 恒溫水浴箱中 加熱 1 2 0 m i n o兩組均在3 7 0 C 5 % C 0 2 溫箱中 靜置1 0 天( 中間換含有S C L完全培養(yǎng)液 1 次)