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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究CADPE體外抗腫瘤作用,對(duì)其誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡機(jī)制進(jìn)行初步研究,通過(guò)S180腫瘤模型和H22腫瘤模型評(píng)價(jià)CADPE體內(nèi)抗腫瘤作用,并通過(guò)研究CADPE對(duì)正常細(xì)胞的影響來(lái)評(píng)價(jià)其安全性。
方法:體外實(shí)驗(yàn),分別運(yùn)用SRB的方法測(cè)定CADPE對(duì)胃癌細(xì)胞株AGS和HGC-27的細(xì)胞毒作用,計(jì)算抑制率及IC50。分別測(cè)定CADPE,5-FU,DOX對(duì)肝細(xì)胞HL-7702的影響。通過(guò)Annexin v/PI流式法和Hoechst3
2、3342染色方法觀(guān)測(cè)CADPE誘導(dǎo)凋亡情況,并計(jì)算凋亡率。用Western Blot方法,檢測(cè)Casepase-3蛋白及Bcl-2, Bax蛋白表達(dá)情況。DCFH-DA染色檢測(cè)CADPE對(duì)細(xì)胞內(nèi)ROS的影響。體內(nèi)實(shí)驗(yàn):通過(guò)S180腫瘤模型和H22腫瘤模型評(píng)價(jià)CADPE在體內(nèi)抗腫瘤的作用,并通過(guò)全自動(dòng)血細(xì)胞檢測(cè)儀檢測(cè)該化合物對(duì)白細(xì)胞的影響。
結(jié)果:體外實(shí)驗(yàn),CADPE能顯著抑制胃癌細(xì)胞的活力并促進(jìn)其凋亡。CADPE處理72h對(duì)人
3、胃癌細(xì)胞AGS和HGC-27的IC50分別為13.1μM和18.5μM,但對(duì)正常肝臟細(xì)胞活力未見(jiàn)顯著的抑制作用。CADPE能夠誘導(dǎo)HGC-27凋亡,下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白水平,并且上調(diào)促凋亡蛋白Bax蛋白水平,激活凋亡蛋白Casepase-3的表達(dá)。CADPE處理24h,HGC-27細(xì)胞內(nèi)ROS顯著升高。體內(nèi)實(shí)驗(yàn),CADPE可顯著抑制腫瘤塊的生長(zhǎng)。與5-氟尿嘧啶和環(huán)磷酰胺不同,CADPE沒(méi)有顯著減少荷瘤小鼠白細(xì)胞的數(shù)量。
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