瑞香狼毒總黃酮的微波輔助萃取及體外抗腫瘤活性.pdf

1、目的：本課題以乙醇為溶劑，研究微波輔助萃取瑞香狼毒總黃酮(SCTF)的最佳工藝條件；分離純化得到有效單體，光譜鑒定確定結(jié)構(gòu)類型；研究有效單體的體外抗腫瘤活性。 方法： 1.SCTF的提取、分離、純化：以乙醇為溶劑，先用傳統(tǒng)中藥提取分離方法(索氏提取法)提取瑞香狼毒總黃酮，再依次上聚酰胺柱，大孔吸附樹脂柱和硅膠柱純化黃酮類化合物。 2.微波輔助萃取正交試驗設(shè)計：首先對固液比(A)、溶劑濃度(B)、微波輻射時間(C)

2、、微波輻射功率(D)四個單因素對SCTF提取率的影響進行實驗，在此基礎(chǔ)上設(shè)計L<,9>(3<'4>)正交實驗組合表，用島津-2550型紫外一可見分光光度計，在黃酮的最佳吸收波長298nm處測定吸光度，由回歸方程算出的總黃酮濃度為指標，來研究微波輔助萃取SCTF的最佳工藝條件。 3.純化得到的SCTF分別作<'1>HNMR、<'13>CNMR和MS鑒定。 4.體外抗腫瘤實驗：SCTF以0.063.1.000μg/ml濃度處

3、理人宮頸癌細胞Hela和結(jié)腸腺癌細胞SW480，以自動酶標儀檢測細胞MTT轉(zhuǎn)化率，以腫瘤抑制率為指標考察其抗腫瘤藥理活性。 結(jié)果： 1.SCTF化合物純度接近95％，經(jīng)定性分析和波譜解析確定為雙黃酮類化合物?？勺鳛榭傸S酮定量分析的對照品。 2.微波提取優(yōu)化工藝條件為：B<,3>C<,3> A<,2>D<,3>,即溶劑濃度為90％，輻射時間為60秒，固液比為1：15，微波功率為900W時，總黃酮提取率比較理想。其中

4、溶劑濃度對總黃酮提取率有顯著性影響(P<0.05)。微波輔助萃取總黃酮的相對提取率為56.79％～100.41％。 3.SCTF在0.063-1.000μg/ml藥物濃度范圍對人宮頸癌細胞Hela和結(jié)腸腺癌細胞SW480的MTT甲臜的形成均有抑制作用，抑制率分別為9.11％-72.59％，6.32％-63.01％。 結(jié)論：本試驗將常壓微波醇提取技術(shù)首次應(yīng)用于SCTF成分的提取，并與常規(guī)提取方法作了比較。結(jié)果表明，以乙醇為