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文檔簡(jiǎn)介
1、 目的:本研究旨在通過(guò)對(duì)Bcl-2和NF-κB在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中表達(dá)及意義的研究,揭示兩者在膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展及細(xì)胞凋亡中的相互關(guān)系,為膠質(zhì)瘤的基因治療及生物治療提供新的理論依據(jù)?! 》椒ǎ菏紫葘⑹灅?biāo)本制成5微米厚的切片,常規(guī)二甲苯脫蠟、酒精脫水后,浸入3﹪過(guò)氧化氫溶液中,室溫下孵育15分鐘以阻斷過(guò)氧化物酶活性。切片浸入0.01M枸櫞酸溶液(PH6.0)中,用500W微波爐加熱進(jìn)行抗原修復(fù)。滴加二抗動(dòng)物血清封閉,室溫下孵育30分鐘,
2、消除非特異性反應(yīng)。滴加鼠抗人Bcl-2和NF-κB單克隆抗體,室溫下孵育1小時(shí)。然后滴加生物素標(biāo)記的二抗,室溫條件下孵育30分鐘。再進(jìn)行DAB顯色,最后用蘇木素復(fù)染。脫水透明后用中性樹(shù)膠封固?! 〗Y(jié)論:1.作為凋亡抑制基因,Bcl-2在非腫瘤腦組織無(wú)表達(dá),在各級(jí)別腦膠質(zhì)瘤中均有表達(dá)。其中在高度惡性組中的陽(yáng)性率顯著高于低度惡性組的陽(yáng)性率,Bcl-2的表達(dá)強(qiáng)度隨著腫瘤級(jí)別的增高而提高。2.作為轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,NF-κB在非腫瘤腦組織中無(wú)表達(dá)
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