兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞穴位移植對(duì)梗死區(qū)心肌細(xì)胞再生及其凋亡的影響.pdf

1、目的：探討兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)穴位移植對(duì)缺血心肌細(xì)胞的修復(fù)重建能力，并進(jìn)一步研究MSCs穴位注射對(duì)梗死區(qū)心肌細(xì)胞凋亡的影響及凋亡調(diào)控蛋白Fas，F(xiàn)asL，Bcl-2表達(dá)的影響。 方法：將已建立心肌梗死模型的日本大耳白兔隨機(jī)分為3組，模型對(duì)照組、穴位注射干細(xì)胞組、穴位注射生理鹽水組。用開(kāi)胸結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前降支的方法建立急性心肌梗死模型，1周后穴位注射干細(xì)胞組經(jīng)穴位注射已經(jīng)分離，培養(yǎng)，擴(kuò)增、標(biāo)記后的MSCs懸液，穴位注射生理

2、鹽水組經(jīng)穴位注射等量的生理鹽水。對(duì)梗死區(qū)進(jìn)行Brdu免疫組化染色以觀察穴位移植MSEs是否遷移至梗死區(qū)；對(duì)Brdu染色陽(yáng)性的細(xì)胞復(fù)染心肌特異性肌鈣蛋白T染色以觀察遷移的細(xì)胞是否分化及分化的性質(zhì)；采用脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)原位缺口標(biāo)記(TUNEL法)確定細(xì)胞凋亡數(shù)，免疫組化SABC方法觀察心肌細(xì)胞中Fas、FasL、Bcl-2的表達(dá)。 結(jié)果：(1)穴位注射MSCs組梗死區(qū)組織免疫組化brdu染色陽(yáng)性；梗死區(qū)組織cTnT染色陽(yáng)性；

3、(2)凋亡細(xì)胞的表達(dá)，模型對(duì)照組和穴位注射生理鹽水組均高于正常對(duì)照組P＜0.001，穴位注射干細(xì)胞組低于模型對(duì)照組和穴位注射生理鹽水組P＜0.05。Fas蛋白的表達(dá)，模型對(duì)照組高于正常對(duì)照組P＜0.05，穴位注射干細(xì)胞組和穴位注射生理鹽水組均低于模型對(duì)照組P分別＜0.001和0.05，穴位注射生理鹽水組明顯高于穴位注射干細(xì)胞組P＜0.001。FasL蛋白的表達(dá)，模型對(duì)照組和穴位注射生理鹽水組均高于正常對(duì)照組P＜0.001，穴位注射干細(xì)胞

4、組明顯低于模型對(duì)照組P＜0.001，穴位注射生理鹽水組明顯高于穴位注射干細(xì)胞組P＜0.001。Bcl-2蛋白表達(dá)，模型對(duì)照組和穴位注射生理鹽水組均低于正常對(duì)照組P＜0.001，穴位注射干細(xì)胞組明顯高于模型對(duì)照組和穴位注射生理鹽水組P＜0.001。 結(jié)論：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞穴位移植，可遷移至梗死區(qū)，并可以在梗死區(qū)分化為心肌樣細(xì)胞；穴位移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可使梗死區(qū)心肌細(xì)胞凋亡數(shù)減少，其機(jī)制可能是通過(guò)Fas、FasL蛋白的減少、Bcl