氯吡格雷對心肌梗死大鼠移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：探討氯吡格雷對心肌梗死SD(Sprague Dawley)大鼠移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSCs)及大鼠心功能的影響，并初步探討其作用機(jī)制。
　　 方法：取8周齡SD大鼠的脛骨及股骨分離骨髓，用全骨髓差異貼壁法分離培養(yǎng)MSCs，并取第3代細(xì)胞作移植用。采用開胸結(jié)扎冠狀動脈分支建立200g SD大鼠心肌梗死模型40只，隨機(jī)分為4組：A組為空白組，灌胃給予安慰劑并經(jīng)尾靜脈移植生理鹽水；

2、B組為干細(xì)胞組，給予安慰劑并進(jìn)行MSCs移植；C組為氯吡格雷組，灌胃給予硫酸氫氯吡格雷片(商品名：波立維)，并移植生理鹽水；D組為實(shí)驗(yàn)組，灌胃給予波立維并進(jìn)行MSCs移植。心肌梗死模型建立后7天開始喂藥(安慰劑或者波立維)3mg/kg，14天時(shí)通過大鼠尾靜脈注射1×106個(gè)MSCs(0.5ml)或0.5ml生理鹽水。6周時(shí)，采用心臟多普勒超聲測量大鼠心臟的左室收縮末期內(nèi)徑(left ventricularinternal diamete

3、r at end-systole，LVIDs)、左室舒張末期內(nèi)徑(left ventricular internaldiameter at end-diastole，LVIDd)、左室射血分?jǐn)?shù)(left ventricular ejection fraction，LVEF)等心功能指標(biāo)，大體標(biāo)本測量心肌梗死面積的大小、免疫酶聯(lián)反應(yīng)檢測心肌中MSCs數(shù)量、新生毛細(xì)血管的數(shù)量等指標(biāo)。體外通過外源性的環(huán)磷腺苷(Cyclic Adenosine

4、Monophosphate，cAMP)觀察其對MSCs增殖的影響。
　　 結(jié)果：A組的LVIDd與C組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，B組顯著小于A組6.45±0.34 VS7.28±0.12(P<0.05)，D組小于A組5.89±0.13mm VS7.28±0.12mm(P<0.05)，B組大于D組6.45±0.34mm VS5.89±0.13mm(P<0.05)。對于LVIDs，A組>C組>B組>D組。對于LVEF值來說，

5、A組0.05)，B組小于A組29.64±1.52％VS36.21±0.80％(P<0.05)，D組顯著小于A組24.52±1.61％VS36.21±0.80％(P<0.05)。D組小于B組24.52±1.61％ VS29.64±1.52％(P<0.05)。A組與C組心肌組織切片中無Brd U陽性細(xì)胞，每個(gè)高倍視野中B組

6、切片中陽性細(xì)胞較D組中少22.2±1.92 VS32.6±3.85(P<0.05)。根據(jù)Ⅷ因子免疫酶聯(lián)反應(yīng)，每個(gè)高倍鏡視野B組梗死心肌內(nèi)新生的毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞較D組少25.6±7.65/mm2 VS38.3±9.24/mm2(P<0.05)。C組血漿中cAMP的濃度較A組高21.05±2.03nmol/L VS10.57±0.89nmol/L(P<0.05)。外源性的cAMP組(OD450nm時(shí))的吸光值明顯高于對照組0.69±0.03