腎上腺髓質(zhì)素基因轉(zhuǎn)染的骨髓間充質(zhì)干細胞缺氧共培養(yǎng)對新生大鼠心肌細胞凋亡的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究腎上腺髓質(zhì)素（ADM）基因轉(zhuǎn)染的骨髓間充質(zhì)干細胞（MSCs）缺氧共培養(yǎng)對新生大鼠心肌細胞凋亡的影響。
　　方法:貼壁法體外分離、擴增培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞。用x-gal染色測含腎上腺髓質(zhì)素基因的重組腺病毒(Ad-ADM)對骨髓間充質(zhì)干細胞感染率。乳鼠心肌細胞分離、純化、培養(yǎng)與鑒定。乳鼠心肌細胞缺氧、無血清條件下培養(yǎng)3、6、12、24小時并檢測其凋亡率。用Transwell小室缺氧、無血清條件下共培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細胞和乳

2、鼠心肌細胞，24小時后檢測共培養(yǎng)體系上清液中腎上腺髓質(zhì)素含量并檢測乳鼠心肌細胞凋亡率。實驗分組為：Ad-ADM轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組，Ad-Null轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組，wildtype共培養(yǎng)組，同時設(shè)置單獨乳鼠心肌細胞缺氧、無血清培養(yǎng)組。
　　結(jié)果:重組腺病毒對骨髓間充質(zhì)干細胞的轉(zhuǎn)染率與病毒感染復(fù)數(shù)（MOI）具有量效關(guān)系，MOI為150時細胞的感染率達95.4％。在缺氧、無血清培養(yǎng)條件下，乳鼠心肌細胞在缺氧3h、6h、12h、24h的凋亡率逐步升

3、高，各時間點凋亡率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001）。三組共培養(yǎng)體系中乳鼠心肌細胞凋亡率明顯低于單獨乳鼠心肌細胞缺氧培養(yǎng)組（P＜0.05）；Ad-ADM轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組乳鼠心肌細胞凋亡率低于空載體轉(zhuǎn)染、共培養(yǎng)組和未轉(zhuǎn)染、共培養(yǎng)組（P＜0.05）?？蛰d體轉(zhuǎn)染、共培養(yǎng)組和未轉(zhuǎn)染、共培養(yǎng)組相比，乳鼠心肌細胞凋亡差異未達到統(tǒng)計學(xué)意義。腎上腺髓質(zhì)素基因轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組的上清液中腎上腺髓質(zhì)素分泌量高于空載體轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組和未轉(zhuǎn)染共培養(yǎng)組（P＜0.05）?？?/p>

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