hTERTmRNA表達(dá)用于乳腺癌鑒別診斷及與TP53和c-Myc相關(guān)性研究.pdf

1、端粒酶是一種核糖核蛋白復(fù)合物，在人類正常體細(xì)胞中不表達(dá)，而在約85％的腫瘤細(xì)胞中，端粒酶活性被重新激活，強烈提示端粒酶重新激活在腫瘤發(fā)生中發(fā)揮著重要作用，已經(jīng)證實端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(telomerasereversetranscriptase)是端粒酶活性的關(guān)鍵限速因子。本研究探討端粒酶hTERTmRNA表達(dá)在人乳腺癌發(fā)生、發(fā)展中的意義以及在乳腺癌診斷中的價值；并觀察腫瘤抑制基因TP53及原癌基因c-Myc與hTERTmRNA表達(dá)的關(guān)系，以

2、期為以hTERT為靶點的腫瘤治療提供實驗依據(jù)。 方法：收集癌旁正常乳腺組織、乳腺導(dǎo)管上皮單純性增生、導(dǎo)管上皮不典型增生、導(dǎo)管原位癌、浸潤性導(dǎo)管癌病例，采用分子原位雜交法進行組織原位檢測hTERTmRNA轉(zhuǎn)錄情況；并采用熒光實時定量RT-PCR技術(shù)(Fluorescencequqntitativereal-timeRT-PCR)定量檢測hTERT和c-Myc基因的轉(zhuǎn)錄水平，同時采用免疫組化方法檢測P53蛋白及c-myc蛋白表達(dá)情況

3、。 結(jié)果：1)分子原位雜交檢測顯示hTERTmRNA在癌旁正常乳腺組織、乳腺導(dǎo)管單純性增生中未見表達(dá)，在導(dǎo)管上皮不典型增生、導(dǎo)管原位癌、浸潤性導(dǎo)管癌中的陽性率分別為25％(5／20)、83．33％(15／18)和88．00％(22／25)，后兩組hTERTmRNA表達(dá)明顯高于前三組(P＜0．05)：hTERTmRNA表達(dá)與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的預(yù)后因素如腫塊大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否及激素表達(dá)水平無相關(guān)性(P＞O．05)。2)乳腺導(dǎo)管癌中

4、hTERTmRNA與P53蛋白表達(dá)呈正相關(guān)(γ=0．3884，P＜0．05)。3)熒光實時定量RT-PCR定量檢測hTERT基因轉(zhuǎn)錄水平顯示，如以MTERT=IO為臨界值，所有正常組織和良性病變的MTERT值均小于此臨界值，而hTERT基因轉(zhuǎn)錄升高的導(dǎo)管原位癌及浸潤性導(dǎo)管癌的MTERT值均大于此臨界值。4)熒光實時定量RT-PCR定量檢測顯示hTERT和c-Myc基因轉(zhuǎn)錄水平呈正相關(guān)(γ=0．7395，P＜O．01)，hTERT轉(zhuǎn)錄水平

5、與c-myc蛋白表達(dá)也呈正相關(guān)(γ=0．6118，P＜O．01)。 結(jié)論：端粒酶hTERT的表達(dá)可能在乳腺癌的組織發(fā)生中起關(guān)鍵作用，端粒酶活性上調(diào)是乳腺癌發(fā)生的早期事件，是癌前病變向癌進展的轉(zhuǎn)折點。熒光實時定量RT-PCR技術(shù)檢測hTERT基因表達(dá)具有高敏感性和特異性，能為常規(guī)病理學(xué)診斷提供客觀的參考指標(biāo)，從而提高乳腺良惡性病變，特別是導(dǎo)管上皮不典型增生與導(dǎo)管原位癌鑒別診斷的準(zhǔn)確性。抑癌基因TP53功能失活及原癌基因c-Myc轉(zhuǎn)