乳腺癌干細胞與乳腺癌預后、及NOTCH通路的相關性研究.pdf

1、第一部分乳腺癌干細胞與乳腺癌預后的相關性研究
　　 目的：分析CD44+/CD24-乳腺癌干細胞、ALDH1+乳腺癌干細胞與臨床預后的相關性。
　　 方法：選取121例在我院治療的原發(fā)性乳腺癌患者，收集其石蠟包埋的原發(fā)灶121例。免疫組織化學熒光雙染法測定乳腺癌干細胞CD44、CD24的表達，免疫組織化學酶標法測定乳腺癌干細胞ALDH1的表達。應用鏡下觀察及圖像處理軟件分析其結果。
　　 結果：原發(fā)病灶中CD44

2、+/CD24-腫瘤干細胞含量范圍0％-70％，中位5.8％。CD44+/CD24-腫瘤細胞干細胞含量與其他病理特征，包括（腫瘤體積、病理分期、LN、ER、PR、HER-2）無明顯相關性。CD44+/CD24-腫瘤干細胞含量與乳腺癌的復發(fā)、轉移無明顯相關性。CD44+/CD24-腫瘤干細胞陽性率與三陰性乳腺癌無明顯相關性。CD44+/CD24-腫瘤干細胞=0％組與CD44+/CD24-腫瘤干細胞>0％組間DFS無統(tǒng)計學意義。原發(fā)病灶中，A

3、LDH1陽性率54.6％。ALDH1與與其他病理特征，包括（腫瘤體積、病理分期、LN、ER、PR、HER-2）無明顯相關性。ALDH1陽性率在SR（-）HER-2（-）組55.7％，較非SR（-）HER-2（-）組陽性率45.0％高，但P>0.05，無統(tǒng)計學差異。故ALDH1與三陰性乳腺癌無明顯相關性。CD44+/CD24-腫瘤干細胞中位含量在ALDH1（+）組9.9％，高于ALDH1（-）組6.3％，但P>0.05，尚不能說明兩組間C

4、D44+/CD24-腫瘤干細胞含量有顯著性差異。ALDH1（+）組與ALDH1（-）組間DFS無顯著性差異。因此，ALDH1與乳腺癌預后無明顯相關性。
　　 結論：未發(fā)現(xiàn)CD44+/CD24-腫瘤干細胞、ALDH1腫瘤干細胞與乳腺癌的復發(fā)、轉移有相關性。未發(fā)現(xiàn)CD44+7CD24-腫瘤干細胞、ALDH1乳腺癌干細胞與三陰性乳腺癌有相關性。未發(fā)現(xiàn)CD44+/CD24-腫瘤干細胞、ALDH1乳腺癌干細胞與乳腺癌患者的臨床預后有相關性

5、。乳腺癌患者中，以ALDH1為特征的腫瘤干細胞與以CD44+/CD24-為特征的腫瘤干細胞無相關性。
　　 第二部分乳腺癌干細胞與復發(fā)、轉移的相關性研究
　　 目的：檢測CD44+/CD24-乳腺癌干細胞在原發(fā)灶與復發(fā)灶中的區(qū)別。
　　 檢測ALDH1乳腺癌干細胞在原發(fā)灶與復發(fā)灶中的區(qū)別。
　　 方法：121例在我院手術的原發(fā)性乳腺癌患者中，選取其中復發(fā)、轉移患者27例，收集其石蠟包埋的原發(fā)灶和復發(fā)病灶。

6、免疫組織化學熒光雙染法測定乳腺癌干細胞CD44、CD24的表達，免疫組織化學酶標法測定乳腺癌干細胞ALDH1的表達。應用鏡下觀察及圖像處理軟件分析其結果。
　　 結果：復發(fā)患者中，CD44+/CD24-腫瘤細胞在復發(fā)灶中的含量（中位26.9％）高于原發(fā)灶的含量（中位7.0％），但P>0.05，不能說明兩組間乳腺癌干細胞含量有顯著性差異。在復發(fā)患者中，ALDH1陽性率在復發(fā)灶中60％（9/15），略高于原發(fā)灶57.1％（12/21

7、），但P>0.05，尚不能說明兩組間ALDH1陽性率有顯著性差異。原發(fā)病灶的ALDH1陽性表達強度，在有復發(fā)、轉移患者組中高于無復發(fā)、轉移的患者組，P<0.005，說明ALDH1與患者的復發(fā)、轉移有相關性。雖然在第一部分中，ALDH1與患者的DFS無關系，但此結果提示ALDH1（+）的乳腺癌患者更易出現(xiàn)復發(fā)、轉移。
　　 結論：ALDH1（+）的乳腺癌患者更易出現(xiàn)復發(fā)、轉移。
　　 第三部分：NOTCH信號通路與乳腺癌干

8、細胞的相關性研究
　　 目的：分析NOTCH通路與以ALDH1為代表的乳腺癌干細胞的關系。分析NOTCH通路與以CD44+/CD24*為代表的乳腺癌干細胞的關系
　　 方法：收集43例原發(fā)性乳腺癌患者，收集其新鮮組織標本及石蠟包埋的原發(fā)灶，免疫組織化學熒光雙染法測定乳腺癌干細胞CD44、CD24的表達，免疫組織化學酶標法測定乳腺癌干細胞ALDH1及NOTCH1的表達。應用鏡下觀察及圖像處理軟件分析其結果。應用熒光定量PC

9、R檢測NOTCH1的mRNA的表達。
　　 結果：乳腺癌患者中，NOTCH1 mRNA的表達在ALDH1（+）組高于ALDH1（-）組，但P>0.05，尚不能說明兩組間NOTCH1的mRNA的表達有顯著性差異。NOTCH1蛋白表達在在ALDH1（+）組陽性率88.2％（15/17），略高于ALDH1（-）組85％（17/20），但P>0.05，尚不能說明兩組間NOTCH1蛋白表達有顯著性差異。雖然NOTCH lmRNA的轉錄水平

10、在ALDHl（+）組中高，NOTCH1蛋白表達的陽性率也在ALDHl（+）組中高，但P均>0.05，尚不能說明在乳腺癌患者中，NOTCH1通路與以ALDH1為特征的腫瘤干細胞之間有聯(lián)系。NOTCH1mRNA的表達在CD44+/CD24-腫瘤干細胞含量=0％組，高于CD44+/CD24-腫瘤干細胞含量>0％組。NOTCH1蛋白表達在CD44+/CD24-腫瘤干細胞含量=0％組，陽性率91.7％（11/12）高于在CD44+/CD24-腫瘤

11、細胞含量>0％組，陽性率85.2％（23/27）。雖然NOTCH1 mRNA表達量與NOTCH1蛋白表達量均在CD44+/CD24-腫瘤干細胞=0％組高。但P均>0.05，尚不能說明NOTCH與以CD44+/CD24-為特征的腫瘤干細胞之間有相關性。
　　 結論：未發(fā)現(xiàn)乳腺癌患者中，NOTCH信號通路與以ALDH1為特征的腫瘤干細胞的有相關性。未發(fā)現(xiàn)乳腺癌患者中，NOTCH通路與以CD44+/CD24-為特征的乳腺癌干細胞的有相