米邦塔仙人掌果膠對小鼠慢性溫和型應激模型抑郁樣癥狀及學習記憶的改善作用.pdf

1、目的:
　　研究本實驗室分離提取的米邦塔仙人掌果膠(milpa alta cactus pectin,MCP)對小鼠慢性溫和型應激模型抑郁樣癥狀的改善作用;研究MCP對小鼠慢性溫和型應激模型學習記憶的改善作用,并初步探討其作用機制;研究GABAA激動劑WAY-141839對MCP處理小鼠慢性溫和型應激模型海馬CA1區(qū)突觸可塑性的影響。
　　方法:
　　采用15-20g健康雄性昆明種小鼠,Morris水迷宮(MWM)篩選

2、之后,將合格小鼠隨機分為6組:空白對照組、模型組、MCP低劑量組(50mg/kg)、MCP中劑量組(100mg/kg)、MCP高劑量組(200mg/kg)、陽性對照組(20mg/kg)。采用慢性溫和型應激(chronic mild stress,CMS)方法造模6周,造模期間空白對照組與模型組每天灌胃給予雙蒸水0.1ml/10g,另外四組分別按照對應藥物濃度每天灌胃給藥。造模期間,每周三從13:00起對小鼠進行斷水斷食處理,8h后稱量小

3、鼠體重;于21:00-周四9:00測試小鼠糖水與雙蒸水消耗量,并計算小鼠糖水偏愛性;造模結(jié)束24h后進行懸尾實驗,48h后進行強迫游泳實驗,96h后進行MWM實驗。完成以上行為學實驗后將小鼠麻醉、斷頭取腦,制備400μm冠狀切片,記錄海馬CA1區(qū)興奮性突觸后電位以及WAY-141839對興奮性突觸后電位LTP維持和誘導的影響。
　　結(jié)果:
　　1.MCP對CMS小鼠體重變化率的影響:
　　從CMS造模第1周起,模型組小

4、鼠體重變化率明顯低于空白對照組(P<0.01);至造模結(jié)束時,與模型組比較,MCP中劑量顯著增加CMS小鼠體重變化率(P<0.05),MCP高劑量及Flu能更為顯著的增加CMS小鼠體重變化率(P<0.01)。
　　2.MCP對CMS小鼠糖水偏愛性的影響:
　　從CMS造模第2周起,模型組小鼠糖水偏愛性明顯低于空白對照組(P<0.01);至造模第5周及第6周,MCP中劑量、MCP高劑量及Flu顯著增加CMS小鼠糖水偏愛性,與模

5、型組比較有顯著性差異(P<0.05)。
　　3.MCP對CMS小鼠懸尾實驗潛伏期及累計不動時間的影響:
　　與空白對照組比較,模型組小鼠潛伏期顯著縮短(P<0.01),累計不動時間顯著延長(P<0.01);與模型組比較有,MCP高劑量組顯著增加CMS小鼠潛伏期(P<0.05),MCP中劑量、MCP高劑量及Flu顯著縮短CMS小鼠累計不動時間(P<0.01)。
　　4.MCP對CMS小鼠強迫游泳實驗潛伏期及累計不動時間的

6、影響:
　　與空白對照組比較,模型組小鼠潛伏期顯著縮短(P<0.01),累計不動時間顯著延長(P<0.01);與模型組比較有,MCP各給藥組并沒能顯著延長CMS小鼠潛伏期(P>0.05),MCP高劑量及Flu顯著縮短CMS小鼠累計不動時間(P<0.05)。
　　5.MCP對CMS小鼠空間學習記憶的影響:
　　學習訓練結(jié)束時,與空白對照組比較,模型組小鼠逃逸潛伏期明顯增加(P<0.01),游泳總路程顯著增加(P<0.01

7、),在目標象限游泳路程/游泳總路程明顯降低(P<0.05);與模型組比較,MCP中劑量、MCP高劑量及Flu明顯降低CMS小鼠逃逸潛伏期(P<0.01)及游泳總路程(P<0.05),但對小鼠在目標象限游泳路程/游泳總路程僅表現(xiàn)出一定的改善趨勢,無顯著性影響(P>0.05)。CMS造模、MCP及Flu給藥對小鼠游泳速度均無影響(P>0.05)。空間探索實驗結(jié)果顯示,模型組小鼠穿越平臺次數(shù)顯著低于空白對照組(P<0.01),MCP中劑量、M

8、CP高劑量及Flu顯著增加CMS小鼠穿越平臺的次數(shù)。
　　6.MCP對CMS小鼠海馬CA1區(qū)突觸可塑性的影響:
　　CMS造模顯著降低小鼠海馬CA1區(qū)長時程增強,與空白對照組比較有顯著性差異(P<0.05);MCP中劑量、MCP高級量及Flu顯著改善CMS小鼠LTP,與模型組比較有顯著性差異。CMS造模對小鼠海馬CA1區(qū)輸入/輸出曲線(I/O)無顯著影響,但MCP中劑量組及MCP高劑量組I/O明顯高于模型組(P<0.05);

9、Flu對CMS小鼠I/O曲線無明顯影響。模型組雙脈沖比率顯著低于空白對照組(P<0.05),MCP高劑量組及陽性對照組雙脈沖比率明顯高于模型組(P<0.05)。
　　7.WAY-141839對MCP處理CMS小鼠海馬CA1區(qū)突觸可塑性的影響:
　?、?WAY-141839對MCP處理CMS小鼠海馬CA1區(qū)LTP維持的影響:高頻刺激(HSF)后30min,給以2.3μM WAY-141839,觀察到各組LTP之間無顯著性差異。

10、我們以給予WAY-141839后所得各組LTP均值與正常記錄所得各組LTP均值做差,結(jié)果顯示W(wǎng)AY-141839明顯降低空白對照組、MCP高劑量組及陽性對照組LTP;與之相反的是模型組、MCP低劑量組和MCP中劑量組LTP卻明顯增加,但MCP中劑量組與模型組比較,其增加幅度較低(P<0.05)。
　?、芖AY-141839對MCP處理CMS小鼠抑郁模型海馬CA1區(qū)LTP誘導的影響:在WAY-141839作用下各組基線呈現(xiàn)不同程度的

11、下降,與空白對照組比較,模型組下降程度明顯降低(P<0.01);與模型組比較MCP中劑量組和MCP高劑量組基線下降程度顯著增加(P<0.01)。在WAY-141839作用下各組LTP間并無顯著性差異,以WAY-141839后所得各組LTP均值與正常記錄所得各組LTP均值做差,結(jié)果顯示W(wǎng)AY-141839顯著降低空白對照組、MCP中劑量組、MCP高劑量組及陽性對照組LTP,而增加模型組、MCP低劑量組LTP,且MCP低劑量組LTP增加明顯