富硒綠茶對小鼠部分免疫功能的影響.pdf

1、目的：觀察富硒綠茶對于小鼠部分免疫功能的影響。
　　 方法：以昆明系雄性小鼠為實驗對象。每項實驗隨機(jī)分為對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組。對照組予煎煮茶葉時用的蒸餾水，其余各組小鼠均予茶葉汁灌胃。低劑量組20mg/20g.bw，中劑量組30mg/20g.bw，高劑量組40mg/20g.bw(茶葉汁濃度為0.1g/L，折合茶葉汁分別為0.2ml、0.3ml、0.4ml)，含硒量(干重)分別為4.02μg、6.03μg、8.04

2、μg，每天一次。1、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬活力測定實驗：分組灌胃8天后24小時內(nèi)用PBS液無菌灌洗腹腔，采集腹腔巨噬細(xì)胞置于96孔板中，經(jīng)過培育后置于酶標(biāo)儀530nm處測定各孔的吸收度。2、溶血空斑實驗：先分組灌胃6天，于第七天予每只小鼠腹腔注射0.2ml 2[％](v/v)雞紅細(xì)胞懸液，繼續(xù)灌胃。灌胃滿10天后24小時內(nèi)無菌取脾，制作脾細(xì)胞懸液,再與10[％]雞紅細(xì)胞懸液混勻并傾倒于已刷有薄層瓊脂糖的玻片上凝固，培育1.5小時后加入適量補(bǔ)體

3、再培育1.5小時，計數(shù)玻片上的溶血空斑數(shù)。3、ConA 誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗：分組灌胃30天后24小時內(nèi)無菌取脾，制作濃度為3×106個/ml 脾細(xì)胞懸液。將每孔1ml細(xì)胞懸液加入12孔培養(yǎng)板，再加入75μlConA液，培育68小時后再加入MTT(5mg/ml)50μl/孔，繼續(xù)培育4小時。出培育箱后每孔加入1ml酸性異丙醇，使紫色結(jié)晶完全溶解后，將溶液移入96孔培養(yǎng)板中置于酶標(biāo)儀570nm處測定吸收度。4、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)

4、胞實驗：分組灌胃30天后24小時內(nèi)每只小鼠腹腔注射1ml 20[％](v/v)的雞紅細(xì)胞懸液，30分鐘后處死小鼠并剪開腹腔灌入2ml生理鹽水，保留1分鐘后吸出1ml平均分滴于2片載玻片上，置于培養(yǎng)箱中培育30分鐘，固定、染色后在光鏡下計數(shù)已經(jīng)吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)量和被吞噬的雞紅細(xì)胞總數(shù)，然后計算吞噬百分率和吞噬指數(shù)。
　　 結(jié)果：1、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬活力測定實驗顯示：低劑量組、中劑量組、高劑量組與對照組相比較吞噬能力均有顯著

5、提高(低、中劑量組與對照組比較，p＜0.01，高劑量組與對照組比較，p＜0.001)。2、溶血空斑實驗顯示：低劑量組、中劑量組、高劑量組與對照組相比較，抗體生成能力均有顯著提高(低劑量組與對照組比較，p＜0.05，中、高劑量組與對照組比較，p＜0.001)。3、ConA 誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗顯示：低劑量組、中劑量組與對照組相比較，有顯著差異性(低劑量組與對照組比較，P＜0.05，中劑量組與對照組比較，P＜0.01)；高劑量組與對照

6、組相比較無差異性(P﹥0.05)。4、小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實驗顯示：吞噬百分率和吞噬指數(shù)低、中劑量組和對照組相比較有顯著差異性(低劑量組與對照組比較，P＜0.05，中劑量組與對照組比較，P＜0.01)；高劑量組與對照組相比較無顯著差異性(P﹥0.05)。
　　 結(jié)論：富硒綠茶低、中劑量均能夠顯著提高小鼠的免疫功能。但是，高劑量短期內(nèi)(灌胃10天)可以增強(qiáng)免疫功能，但長期使用(灌胃30天)卻不能增強(qiáng)免疫功能，可能與其顯著抑