血管緊張素Ⅱ受體活性對骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、第一章血管緊張素Ⅱ受體活性對基礎狀態(tài)下大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注的調(diào)節(jié)作用
　　 研究背景：骨骼肌微循環(huán)是血漿和組織間液之間物質(zhì)交換的場所，骨骼肌微循環(huán)灌注量的改變對物質(zhì)交換起直接調(diào)節(jié)作用。腎素-血管緊張素(Renin-angiotensin system，RAS)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)血管張力及血流動力學穩(wěn)定性方面發(fā)揮重要作用，血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)是RAS系統(tǒng)的主要生物活性物質(zhì)，主要通過與其1型受體(AT1R)和2型受體(AT2R)結(jié)合發(fā)揮

2、作用，AngⅡ?qū)T1R和AT2R具有相似的親和力。在大容量血管及阻力小動脈，AT1R激活介導血管收縮，而AT2R激活可介導血管舒張。AT1R和AT2R在骨骼肌微循環(huán)中分布廣泛，AT1R活性及AT2R活性是否對基礎狀態(tài)下骨骼肌微循環(huán)灌注起調(diào)節(jié)作用，并進而影響骨骼肌葡萄糖利用及胰島素轉(zhuǎn)運，目前并不完全清楚。
　　 目的：給予AT1R拮抗劑氯沙坦和/或AT2R拮抗劑PD123319，觀察基礎狀態(tài)下骨骼肌循環(huán)灌注情況的變化，以明確AT

3、1R活性及AT2R活性對基礎狀態(tài)下骨骼肌微循環(huán)灌注的調(diào)節(jié)作用，并在此基礎上進一步觀察AT1R活性及AT2R活性對骨骼肌攝取胰島素和利用葡萄糖的影響。
　　 方法：(1)骨骼肌微循檢測實驗:SD大鼠（20只）隨機分為氯沙坦給藥組、PD123319給藥組、氯沙坦+PD123319給藥組、氯沙坦+L-NAME給藥組，運用造影增強超聲技術(Contrast-enhancedultrasound，CEU)檢測各組大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注量(M

4、icrovascularblood volume，MBV)的變化;
　　 (2)股動脈血流檢測實驗:SD大鼠（10只），隨機分為氯沙坦給藥組和PD123319給藥組，檢測實驗過程中股動脈血流變化;
　　 (3)骨骼肌葡萄糖利用測定實驗:SD大鼠（20只）隨機分為氯沙坦給藥組、PD123319給藥組、氯沙坦+PD123319給藥組、氯沙坦+L-NAME給藥組，測定大鼠下肢動靜脈葡萄糖差值以明確骨骼肌葡萄糖利用情況;

5、　　 (4)骨骼肌胰島素攝取實驗:SD大鼠（15只），隨機分為對照組、氯沙坦給藥組、氯沙坦+L-NAME給藥組，測定125-Ⅰ胰島素的清除率以明確骨骼肌胰島素攝取情況。
　　 結(jié)果：(1) AT1R拮抗劑氯沙坦給藥后，與基礎值相比，大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注量顯著增加約3倍(p＜0.001)，伴隨骨骼肌葡萄糖利用和胰島素攝取的明顯增加(p＜0.05)。氯沙坦給藥不影響股動脈血流及動脈血壓。
　　 (2) AT2R拮抗劑PD1

6、23319給藥后，與基礎值相比，大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注量降低約80％(p＜0.001)，伴隨骨骼肌葡萄糖利用明顯下降(p＜0.01)。PD123319給藥不影響股動脈血流及動脈血壓。
　　 (3)在同時給予AT2R拮抗劑PD123319的情況下，氯沙坦增加骨骼肌微循環(huán)灌注量及葡萄糖攝取的作用被抑制（與基礎值相比， p＞0.05)。
　　 (4)一氧化氮合成酶抑制劑L-NAME抑制一氧化氮產(chǎn)生后，氯沙坦增加骨骼肌微循環(huán)灌注量

7、、葡萄糖利用及胰島素攝取的作用均被抑制（與基礎值相比，p＞0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 (1)基礎AT1R活性限制骨骼肌微循環(huán)灌注量，并進而影響骨骼肌葡萄糖利用和胰島素攝取;基礎AT2R活性可增加骨骼肌微循環(huán)灌注量，從而增加骨骼肌葡萄糖利用和胰島素轉(zhuǎn)運。
　　 (2) AT1R阻滯后增加骨骼肌微循環(huán)灌注、葡萄糖利用和胰島素攝取的作用，由AT2R介導，并依賴于一氧化氮的作用。
　　 第二章血管緊張素Ⅱ受

8、體活性對基礎狀態(tài)下大鼠骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性的調(diào)節(jié)作用
　　 研究背景：骨骼肌是胰島素調(diào)節(jié)葡萄糖代謝的主要場所，在作用于骨骼肌細胞之前，胰島素必須首先從循環(huán)血液中轉(zhuǎn)運至骨骼肌組織間隙，胰島素的轉(zhuǎn)運是決定其在骨骼肌中發(fā)揮調(diào)節(jié)葡萄糖代謝作用的限速步驟。在正常狀態(tài)下，胰島素可擴張毛細血管前終末小動脈，增加骨骼肌微循環(huán)灌注，擴大物質(zhì)交換面積，促進其自身轉(zhuǎn)運作用。骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性正常，是保證胰島素調(diào)節(jié)糖代謝作用正常發(fā)揮的基礎。血

9、管緊張素系統(tǒng)(RAS)的過度激活影響胰島素在骨骼肌中發(fā)揮調(diào)節(jié)糖代謝的能力，RAS系統(tǒng)對于骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性是否有影響，目前尚無直接證據(jù)。我們在第一章實驗中發(fā)現(xiàn)，基礎狀態(tài)下，AT1R和AT2R活性對骨骼肌微循環(huán)灌注、葡萄糖利用及胰島素轉(zhuǎn)運具有調(diào)節(jié)作用。由于骨骼肌微循環(huán)灌注、胰島素轉(zhuǎn)運與微循環(huán)胰島素敏感性及胰島素調(diào)節(jié)糖代謝的能力密切相關，我們推測AT1R和AT2R活性可能對微循環(huán)胰島素敏感性發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，并進而影響胰島素調(diào)節(jié)糖代謝的能

10、力。
　　 目的：觀察基礎狀態(tài)下AT1R和AT2R活性對胰島素微循環(huán)作用和調(diào)節(jié)糖代謝能力的影響。
　　 方法：(1)胰島素微循環(huán)作用和調(diào)節(jié)糖代謝能力實驗:SD大鼠（15只）隨機分為對照組，氯沙坦給藥組和PD123319給藥組。對照組大鼠接受2小時胰島素鉗夾實驗(3mU/kg.min)，氯沙坦組大鼠在接受胰島素鉗夾試驗同時給予氯沙坦靜脈注射以阻滯AT1R活性，PD123319組鼠在接受胰島素鉗夾試驗同時給予PD123319

11、持續(xù)輸注以阻滯AT2R活性。計算胰島素刺激的葡萄糖處置率(Glucoseinfusion rate，GIR)，用于評價胰島素調(diào)節(jié)糖代謝的能力;運用造影增強超聲技術（Contrast-enhanced ultrasound，CEU）檢測各組大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注量(MBV)的變化，用于評價微循環(huán)胰島素敏感性;整個實驗過程中監(jiān)測動脈血壓;
　　 (2)股動脈血流檢測實驗:SD大鼠（15只），分組及處理同上，檢測實驗過程中股動脈血流變化

12、。
　　 結(jié)果(1)對照組大鼠中，隨著胰島素的輸注，GIR逐漸升高，同時可觀察到MBV的增加，與基礎值相比MBV增加約1.5-2倍(P＜0.05)。
　　 (2)在胰島素輸注的情況下，給予氯沙坦后可觀察到MBV進一步升高，與基礎值相比升高約3倍(P＜0.05);與對照組大鼠相比，氯沙坦給藥對GIR沒有進一步影響(P＞0.05)。
　　 (3)在胰島素輸注的情況下同時給予PD123319輸注，可觀察到胰島素增加MB

13、V的作用消失(P＞0.05，與基礎值相比);伴隨GIR顯著降低，與對照組大鼠相比， PD123319給藥后GIR下降約30％(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：(1)基礎AT1R和AT2R活性影響胰島素調(diào)節(jié)糖代謝的能力，AT1R活性限制胰島素刺激的骨骼肌處理葡萄糖的能力，AT2R活性對于胰島素正常調(diào)節(jié)糖代謝是必需的;
　　 (2)基礎AT1R和AT2R活性影響骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性，AT1R活性限制胰島素增加骨骼肌微循環(huán)灌