一氧化氮合酶抑制劑治療實(shí)驗(yàn)性自身免疫性心肌炎的研究.pdf

1、目的:觀察一氧化氮合酶(NOS)抑制劑NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性自身免疫性心肌炎(EAM)的治療效果并且探討與凋亡相關(guān)的治療機(jī)制。
　　方法:30只Balb/C雄性小鼠,隨機(jī)分成3組(n=10):正常對(duì)照組、模型組和實(shí)驗(yàn)組。模型組和實(shí)驗(yàn)組分別在第0d和第7d在小鼠雙側(cè)腹股溝和腋窩皮下給予豬心肌肌凝蛋白注射,腹腔注射百日咳毒素制作EAM模型,實(shí)驗(yàn)組于第1~21d給予L-NAME(5mg/(kg·day))

2、腹腔注射,模型組給予等劑量生理鹽水。第21d眼球取血后斷髓處死小鼠,計(jì)算心臟重量/體重(HW/BW);HE染色檢測(cè)各組心肌炎癥積分;原位末端缺口標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)檢測(cè)各組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù);化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)各組血清一氧化氮(NO)的含量和分光光度法檢測(cè)血清誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的活性;實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)心臟中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-3、Caspase-8和Ca

3、spase-9)和iNOS mRNA表達(dá)水平;免疫組織化學(xué)檢測(cè)Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果:模型組的HW/BW、心肌炎癥積分、NO含量、iNOS活性和mRNA表達(dá)、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9mRNA和蛋白表達(dá)以及心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01);與模型組相比,實(shí)驗(yàn)組除HW/BW(P<0.05)降低外,心肌炎癥積分、血清NO含量、