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文檔簡介
1、目的:
觀察阿司匹林對博萊霉素所致大鼠肺纖維化的抑制作用,并探討其作用機制。
方法:
取體重250g左右的健康清潔級雄性SD大鼠60只,隨機分為生理鹽水對照組、博萊霉素模型組、甲基強的松龍治療組和阿司匹林治療組,每組各15只。生理鹽水對照組經(jīng)氣管插管注入生理鹽水0.2mL,其他各組注入博萊霉素5mg/kg制備成模型。此后甲基強的松龍治療組和阿司匹林治療組每天灌胃給藥分別予甲基潑尼松龍6 mg/ kg或阿司匹
2、林10mg/kg,生理鹽水對照組和博萊霉素模型組每天等量生理鹽水灌胃。于第7天、14天、28天每組各處死5只,取其肺組織作以下測試:HE染色病理學(xué)觀察;酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbent assay,ELISA)檢測羥脯氨酸、IL-4、TNF-α、轉(zhuǎn)化生長因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)和角化細胞生長因子(keratinocyte growth fac
3、tor,KGF)水平;Real-Time PCR檢測 TGF-β的mRNA表達。
結(jié)果:
一、大鼠一般情況
生理鹽水對照組大鼠飼養(yǎng)期間無異常表現(xiàn),其余三組大鼠在氣管內(nèi)注射博萊霉素后出現(xiàn)呼吸道分泌物增多,肌肉顫動,呼吸加快,食欲和活動減退表現(xiàn)。所有癥狀在造模后5分鐘出現(xiàn)并逐漸達到發(fā)作高峰,持續(xù)2小時左右。博萊霉素模型組第7天開始逐漸出現(xiàn)活動能力減退,口鼻部粘膜紫紺表現(xiàn),隨著飼養(yǎng)至第28天,口鼻部粘膜紫紺更為明
4、顯。同時,博萊霉素模型組大鼠出現(xiàn)明顯消瘦,毛發(fā)紊亂等營養(yǎng)不良表現(xiàn)。甲基強的松龍治療組和阿司匹林治療組大鼠于第7天開始也出現(xiàn)消瘦,毛發(fā)紊亂,活動能力減退,口鼻部粘膜紫紺,但程度較博萊霉素模型組輕。
二、病理學(xué)改變:
HE染色顯示:博萊霉素模型組大鼠肺組織在第7天時出現(xiàn)明顯的出血滲出炎癥反應(yīng),在第28天時出現(xiàn)明顯的肺組織纖維化。阿司匹林治療組肺組織病理與博萊霉素模型組比較,第7天時大鼠肺組織的炎性滲出較輕,第28天時肺組
5、織纖維化程度也較輕。甲基強的松龍治療組第7天時出現(xiàn)的出血滲出炎癥反應(yīng)和第28天時出現(xiàn)的肺組織纖維化程度介于博萊霉素模型組和阿司匹林治療組之間。
三、肺組織的生化指標(biāo)改變:
博萊霉素模型組肺組織的羥脯氨酸、IL-4、TNF-α水平較生理鹽水對照組有明顯升高(p<0.05),其肺組織TGF-β含量也明顯高于生理鹽水對照組(p<0.01)。
阿司匹林治療組肺組織的羥脯氨酸、IL-4、TNF-α含量較博萊霉素模型組
6、為低(p<0.01),其肺組織TGF-β含量也低于博萊霉素模型組(p<0.05)。
阿司匹林治療組與甲基強的松龍治療組相比較,前者肺組織的羥脯氨酸含量低于甲基強的松龍治療組(p<0.01),而IL-4、TNF-α、TGF-β兩組之間則無明顯差異(p>0.05)
四、Real-time PCR方法測定肺組織TGF-βmRNA表達
阿司匹林治療組與博萊霉素模型組相比,前者TGF-β mRNA表達量在第7、14、
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