益氣活血清金方抗博萊霉素致大鼠肺纖維化作用機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:基于TGF-β/Smad信號通路初步探究益氣活血清金方抗博萊霉素致大鼠纖維化生物學作用機制。
  方法:采用體重200±20g的SD雄性大鼠96只隨機分為空白對照組(K)、模型組(BLM)、陽性對照組(P)、益氣活血清金方中藥組(Y),每組24只,每籠8只。除K組外其余各組均采用一次性氣管注射博來霉素(5mg/kg)法誘導肺纖維化模型,K組采用一次性氣管注射生理鹽水(5mg/kg)作為對照。K和BLM組每天生理鹽水(10g/

2、kg·d)灌胃,P組用強的松(4.2mg/kg·d)灌胃,Y組用益氣活血清金方(9.45g/kg·d)灌胃,于實驗第7、14、28天分三批次處死動物,股動脈采血分離血清,用放射免疫法檢測PCⅢNP、CⅣ、HA、LN;取肺組織做HE、Masson染色,免疫組化半定量法分析CⅠ、TGF-βRI、TGF-βRII、Smad3、Smad7含量,RT-PCR法分析TGF-β1 mRNA、Smad3 mRNA、Smad7 mRNA表達量。
 

3、 結果:BLM組相關檢測指標與K組相比均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。在促進體重增加、防止肺濕重過度增加、改善大鼠肺系數(shù)等方面Y組與BLM組相比可有顯著性差異(P<0.05)。HE染色病理結果顯示:在第28天時Y組與BLM組相比無明顯纖維瘢痕形成。Masson染色結果顯示:各時間點Y組代表膠原沉積的藍染區(qū)明顯比BLM組面積少,且顏色淺淡。放射免疫法檢測PCⅢNP、CⅣ、HA、LN的結果:中、后期Y組與BLM組相比均有統(tǒng)計意義(P<0.0

4、5)。免疫組化法檢測CⅠ、TGF-βRI、TGF-βRII、Smad3、Smad7平均積分光密度值(MIOD)結果:Y組與BLM組CⅠ、TβRI、TβRII、Smad3、Smad7的MIOD相比除TGF-βRⅠ第7、14天,Smad7第7天沒有統(tǒng)計學差異,其它比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。RT-PCR法檢測TGF-β1、Smad3、Smad7mRNA結果:Y組與BLM組除Smad3、Smad7mRNA第7天比較無明顯統(tǒng)計學差異,其它

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