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文檔簡介
1、目的:觀察結(jié)直腸癌及其肝轉(zhuǎn)移癌組織中CD133、CXCR4的表達情況,明確CD133+CXCR4+細胞在結(jié)直腸癌組織及其細胞系HCT116中的細胞含量,探究CD133+CXCR4+結(jié)直腸癌腫瘤細胞的生物學(xué)特性。
方法:應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測結(jié)直腸癌及其肝轉(zhuǎn)移癌組織標(biāo)本的CD133、CXCR4的表達情況。運用FACSAria流式細胞儀檢測結(jié)直腸癌及其肝轉(zhuǎn)移癌組織標(biāo)本、結(jié)直腸癌細胞株HCT116中CD133+細胞、CXCR4+細胞
2、及CD133+CXCR4+細胞的細胞含量。對結(jié)直腸HCT116細胞株細胞進行FACSAria流式細胞儀分選,分選出CD133+及CD133-細胞,利用FACSAria流式細胞儀對此二類細胞的CXCR4+表型細胞含量進行檢測并分別進行成球培養(yǎng)實驗;分選出的CD133+CXCR4+、CD133+CXCR4-、CD133-CXCR4+、CD133-CXCR4-四類細胞于體外進行5-FU藥敏MTT實驗、克隆形成實驗以及遷移侵襲實驗。
3、結(jié)果:(1)免疫組織化學(xué)法檢測結(jié)果顯示結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移灶組織中CXCR4表達率高于原發(fā)灶(P=0.032)。
(2)FACSAria流式細胞儀分析檢測結(jié)果顯示肝轉(zhuǎn)移灶組織中CD133+CXCR4+細胞率高于癌旁組織及原發(fā)灶組織(P<0.001,P=0.014)。
(3)經(jīng)FACSAria流式細胞儀分選檢測,CD133+細胞中CXCR4+細胞比率高于CD133-細胞(P<0.001),CD133+細胞成球所需細胞濃度低于
4、CD133-細胞(P=0.01)并且CD133+細胞成球所需時間短于CD133-細胞(P=0.002)。
(4)MTT藥敏實驗及克隆形成實驗分別顯示CD133+細胞較CD133-細胞耐藥能力及增殖能力強(P<0.001,P<0.001)。遷移侵襲實驗顯示CD133+CXCR4+細胞具有很強的遷移、侵襲能力。
結(jié)論:(1)結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移灶組織中CXCR4表達率高于原發(fā)灶組織。
(2)結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移灶組織中CD
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