結(jié)直腸癌異時性肝轉(zhuǎn)移的分子標志

1、結(jié)直腸癌異時性肝轉(zhuǎn)移的分子標志物：miR-181a及其生物學功能,顧晉 陳治國北京腫瘤醫(yī)院北京大學臨床腫瘤學院,研究背景,microRNA的概念及其作用機制,研究背景,miRNA對腫瘤的發(fā)生發(fā)展起著重要的作用miRNA在不同腫瘤組織中具有特征性表達模式miRNA與腫瘤的生物學行為密切相關可用于診斷CLL、乳腺癌和軟組織肉瘤等腫瘤miRNA與結(jié)直腸癌（CRC）肝轉(zhuǎn)移的關系？,實驗目的,篩選可能有助于預測CRC肝轉(zhuǎn)移的m

2、iRNAsCRC肝轉(zhuǎn)移相關的miRNAs功能研究,,,,無肝轉(zhuǎn)移的CRC,肝轉(zhuǎn)移,,,,miRNA表達的芯片檢測,,,,,,伴有同時性肝轉(zhuǎn)移的CRC,,,生物信息學分析,,,原位雜交檢測,,,,,,,篩選出CRC肝轉(zhuǎn)移相關miRNAs,,,分子生物學驗證,,,,組織芯片構(gòu)建,實驗方案,實驗方案,體外培養(yǎng),病毒感染,基因增強表達效率測定,比較轉(zhuǎn)染前后生物學性狀的改變,,,低轉(zhuǎn)移潛能CRC細胞系HT29,,接種,裸鼠移殖瘤,,,,,,,,

3、,,,,裸鼠局部成瘤能力,浸潤能力,生長增殖,,,,,裸鼠局部瘤的轉(zhuǎn)移潛能,,,,,,,攜帶miRNA前體的慢病毒表達載體,實驗結(jié)果,完成miRNA芯片檢測 無肝轉(zhuǎn)移的CRC組織：5例伴有同時性肝轉(zhuǎn)移的CRC組織：5例篩選出7個在兩組間差異表達倍數(shù)大于1.7倍的miRNAsmiR-181a，152，320aLet-7d，miR-15b，20b，223,實驗結(jié)果,構(gòu)建組織芯片同時性肝轉(zhuǎn)移的CRC原發(fā)灶 ：n=160異時性肝轉(zhuǎn)

4、移的CRC原發(fā)灶 ：n=37無肝轉(zhuǎn)移的CRC原發(fā)灶：n=97遠癌正常CRC粘膜：n=72原位雜交Dig標記的LNA探針,實驗結(jié)果,構(gòu)建慢病毒過表達載體LV-miR-181a-GFPLV-NC-GFP慢病毒載體轉(zhuǎn)染HT29細胞系,實驗結(jié)果,Figure 1. miRNA detection in colorectal cancer tissues by LNA-ISH.,表1. miRNAs在CRC組織中的表達情況,,Fig

5、ure 2. . overall survival in CRC patients with different expression level of miR-181a,Figure 3.The expression of reporter gene GFP in HT29 cell line,,Figure 4.The fold change of the miR-181a expression in cell line,Figur

6、e 5. miR-181a enhance the proliferation of HT29 cell,,Figure 6. miR-181a enhance the migration of HT29 cell in vitro,,Figure 7. miR-181a enhance the migration and invasion of HT29 cell in vitro,,Figure 8. In vivo tumor g