肽聚糖與氨磷汀對10Gy全身照射小鼠的協同救治作用.pdf

1、目的：探討肽聚糖(peptidoglycan，PGN)與氨磷汀(amifostine，WR2721)對接受10GyX射線(IR)全身照射小鼠的救治作用。
　　 方法：將C57BL/6J小鼠隨機分為IR+肽聚糖給藥組、IR+氨磷汀給藥組、IR+肽聚糖+氨磷汀給藥組、IR組、未處理組，于照射前0.5小時按150mg/kg給予氨磷汀，照后24小時給予肽聚糖，除未處理組外其余各組給予10Gy(2Gy/min)X射線全身照射。(1)記錄3

2、0天內各組小鼠的體重，比較不同處理組間30天生存率。(2)于照后1.25天、第4天、第9天、第16天、第25天、第40天分批處死各組小鼠，取血、股骨、腸標本，予蘇木素-伊紅染色，并利用D-木糖吸收率、糞便形成計數、結腸炎癥評分、腸道隱窩干細胞標記計數實驗，比較各時間點各組小鼠腸道功能損傷程度。(3)應用CD34標記流式細胞計數、骨髓干細胞集落培養(yǎng)、細胞因子測定，反應不同處理對小鼠造血的影響。(4)提取聯合給藥組、未處理組及IR組小鼠小腸

3、蛋白，應用Western-blot法分析各組小鼠腸道中TLR2蛋白水平。(5)將TLR2-/-小鼠隨機分為聯合給藥組、未處理組、IR組，重復上述實驗。
　　 結果：(1)聯合給藥組C57BL/6J小鼠30天生存率達到50％，兩組單獨給藥組都在9天內死亡，而IR組則在5天內全部死亡，聯合給藥組與其余各組間區(qū)別有統計學差異P＜0.01）。(2)各組小鼠照后5天內體重均有明顯下降，聯合給藥組小鼠體重逐漸穩(wěn)定，但30天內并未恢復到照前水

4、平，而其余各組小鼠體重持續(xù)下降，直至死亡。聯合給藥組C57BL/6J小鼠骨髓與腸道經數星期的恢復，在照后40天幾乎恢復到正常水平，而其余各組均顯示明顯且不可恢復的骨髓、腸道損傷。(3)聯合給藥組小鼠木糖吸收率保持在60％以上，而其余各組均下降極快P＜0.05）;聯合給藥組小鼠腸道保有部分吸收功能，而其他組糞便形成能力不足P＜0.05）;聯合給藥組小鼠結腸炎癥程度評分僅為3.71±0.57，而IR組評分達到5.57±1.34(P＜0.05

5、);聯合給藥組小鼠保存較少的腸道隱窩干細胞，而其余各組到照后第4天僅存極少的隱窩干細胞。(4)利用CD34標記流式細胞計數，可見各照射組均有少量CD34標記的造血干細胞，但照后4天內，受照各組小鼠骨髓干細胞集落培養(yǎng)實驗均無集落形成，照后一周左右開始，聯合給藥組小鼠造血逐漸得到恢復，在照后40天其集落形成數與未處理組并無統計學差異;但聯合給藥未有效改善該組小鼠血中細胞因子水平。(5)TLR2-/-小鼠聯合給藥組與IR組各指標均無統計學差異