肽聚糖與氨磷汀對(duì)10Gy全身照射小鼠的協(xié)同救治作用.pdf

1、目的：探討肽聚糖(peptidoglycan，PGN)與氨磷汀(amifostine，WR2721)對(duì)接受10GyX射線(xiàn)(IR)全身照射小鼠的救治作用。
　　 方法：將C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為IR+肽聚糖給藥組、IR+氨磷汀給藥組、IR+肽聚糖+氨磷汀給藥組、IR組、未處理組，于照射前0.5小時(shí)按150mg/kg給予氨磷汀，照后24小時(shí)給予肽聚糖，除未處理組外其余各組給予10Gy(2Gy/min)X射線(xiàn)全身照射。(1)記錄3

2、0天內(nèi)各組小鼠的體重，比較不同處理組間30天生存率。(2)于照后1.25天、第4天、第9天、第16天、第25天、第40天分批處死各組小鼠，取血、股骨、腸標(biāo)本，予蘇木素-伊紅染色，并利用D-木糖吸收率、糞便形成計(jì)數(shù)、結(jié)腸炎癥評(píng)分、腸道隱窩干細(xì)胞標(biāo)記計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)，比較各時(shí)間點(diǎn)各組小鼠腸道功能損傷程度。(3)應(yīng)用CD34標(biāo)記流式細(xì)胞計(jì)數(shù)、骨髓干細(xì)胞集落培養(yǎng)、細(xì)胞因子測(cè)定，反應(yīng)不同處理對(duì)小鼠造血的影響。(4)提取聯(lián)合給藥組、未處理組及IR組小鼠小腸

3、蛋白，應(yīng)用Western-blot法分析各組小鼠腸道中TLR2蛋白水平。(5)將TLR2-/-小鼠隨機(jī)分為聯(lián)合給藥組、未處理組、IR組，重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)。
　　 結(jié)果：(1)聯(lián)合給藥組C57BL/6J小鼠30天生存率達(dá)到50％，兩組單獨(dú)給藥組都在9天內(nèi)死亡，而IR組則在5天內(nèi)全部死亡，聯(lián)合給藥組與其余各組間區(qū)別有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＜0.01）。(2)各組小鼠照后5天內(nèi)體重均有明顯下降，聯(lián)合給藥組小鼠體重逐漸穩(wěn)定，但30天內(nèi)并未恢復(fù)到照前水

4、平，而其余各組小鼠體重持續(xù)下降，直至死亡。聯(lián)合給藥組C57BL/6J小鼠骨髓與腸道經(jīng)數(shù)星期的恢復(fù)，在照后40天幾乎恢復(fù)到正常水平，而其余各組均顯示明顯且不可恢復(fù)的骨髓、腸道損傷。(3)聯(lián)合給藥組小鼠木糖吸收率保持在60％以上，而其余各組均下降極快P＜0.05）;聯(lián)合給藥組小鼠腸道保有部分吸收功能，而其他組糞便形成能力不足P＜0.05）;聯(lián)合給藥組小鼠結(jié)腸炎癥程度評(píng)分僅為3.71±0.57，而IR組評(píng)分達(dá)到5.57±1.34(P＜0.05

5、);聯(lián)合給藥組小鼠保存較少的腸道隱窩干細(xì)胞，而其余各組到照后第4天僅存極少的隱窩干細(xì)胞。(4)利用CD34標(biāo)記流式細(xì)胞計(jì)數(shù)，可見(jiàn)各照射組均有少量CD34標(biāo)記的造血干細(xì)胞，但照后4天內(nèi)，受照各組小鼠骨髓干細(xì)胞集落培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)均無(wú)集落形成，照后一周左右開(kāi)始，聯(lián)合給藥組小鼠造血逐漸得到恢復(fù)，在照后40天其集落形成數(shù)與未處理組并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;但聯(lián)合給藥未有效改善該組小鼠血中細(xì)胞因子水平。(5)TLR2-/-小鼠聯(lián)合給藥組與IR組各指標(biāo)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異