磁性固相萃取和新型液相微萃取在醛類肺癌代謝標記物分析中的應用.pdf

1、對癌癥的無創(chuàng)診斷一直是臨床醫(yī)學領域研究的熱點。常規(guī)的診斷技術周期較長、費用昂貴，有的診斷方法如穿刺活檢等往往會給患者帶來極大的痛苦。通過檢測肺癌患者體液中某些小分子代謝標記物的含量可以為肺癌的早期診斷提供一定的依據(jù)，是一種很有發(fā)展前景的無創(chuàng)診斷方法。但人體體液如血液和尿液中復雜的基質(zhì)容易干擾實驗測定，因此需選擇合適的樣品前處理方法對樣品進行分離、富集和純化，以提高檢測的準確度和靈敏度。
　　 磁性固相萃取法是近年來發(fā)展起來的一種

2、新型的樣品前處理技術。該技術采用磁性納米粒子為吸附萃取劑，利用納米粒子較大的比表面積或表面鍵和的特異性官能團對樣品中目標物進行萃取，通過外加磁場實現(xiàn)目標物和樣品溶液的分離。該方法實驗萃取效率高、操作簡便，無需樣品離心的步驟，節(jié)省了實驗用時，且有機溶劑的使用量少，減少了有機試劑環(huán)境污染及對實驗操作人員的毒害。
　　 凝固-漂浮有機液滴液相微萃取法(SFODLPME)是一種由傳統(tǒng)的液相微萃取(LPME)發(fā)展而來的樣品前處理方法，具有

3、萃取效率高、操作簡單、成本較低和環(huán)境友好等優(yōu)點。傳統(tǒng)的LPME法只能選擇密度比水大且對被萃取物有良好親和性的有機溶劑為萃取劑，而SFODLPME法選擇密度比水小、凝固點與室溫接近的有機溶劑如1-十二醇等為萃取劑，擴大了傳統(tǒng)LPME對萃取劑的選擇。
　　 本課題采用了這兩種新型的樣品前處理技術并將其與高效液相色譜聯(lián)用，對人體體液中的己醛和庚醛含量進行檢測。
　　 主要研究內(nèi)容有：
　　 1、采用磁性固相萃取和高效液

4、相色譜聯(lián)用的方法，對人體尿樣中的己醛和庚醛的含量進行測定。首先讓目標物進行衍生化反應，以2，4-二硝基苯肼為衍生化試劑，甲酸為反應催化劑，而后以amine-Fe3O4磁性納米粒子為吸附劑，成功分離萃取了醛類物質(zhì)的衍生化產(chǎn)物。優(yōu)化了一系列衍生化反應及萃取的條件，并將其應用于人體尿樣的分析檢測。
　　 2、采用磁性固相萃取和高效液相色譜聯(lián)用的方法，對人體尿樣中的己醛和庚醛的含量進行測定。以C8-amine-Fe3O4磁性納米粒子為吸

5、附劑，對吸附劑的用量、衍生化試劑的用量、催化劑的用量、衍生化反應時間及溫度、鹽效應等條件進行了優(yōu)化，并將其應用于實際尿樣的分析檢測。
　　 3、采用凝固-漂浮有機液滴液相微萃取和高效液相色譜聯(lián)用的方法，對人體血樣中己醛和庚醛的含量進行測定。實驗選用1-十二醇為萃取劑，對衍生化產(chǎn)物腙進行萃取。萃取完成后，將樣品溶液置于低溫環(huán)境中，1-十二醇迅速凝固，復溶后取樣進行色譜分析。優(yōu)化了一系列衍生化反應條件及萃取條件，并將其應用于實際血樣