磁性固相萃取和新型液相微萃取在醛類肺癌代謝標(biāo)記物分析中的應(yīng)用.pdf

1、對(duì)癌癥的無創(chuàng)診斷一直是臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。常規(guī)的診斷技術(shù)周期較長(zhǎng)、費(fèi)用昂貴，有的診斷方法如穿刺活檢等往往會(huì)給患者帶來極大的痛苦。通過檢測(cè)肺癌患者體液中某些小分子代謝標(biāo)記物的含量可以為肺癌的早期診斷提供一定的依據(jù)，是一種很有發(fā)展前景的無創(chuàng)診斷方法。但人體體液如血液和尿液中復(fù)雜的基質(zhì)容易干擾實(shí)驗(yàn)測(cè)定，因此需選擇合適的樣品前處理方法對(duì)樣品進(jìn)行分離、富集和純化，以提高檢測(cè)的準(zhǔn)確度和靈敏度。
　　 磁性固相萃取法是近年來發(fā)展起來的一種

2、新型的樣品前處理技術(shù)。該技術(shù)采用磁性納米粒子為吸附萃取劑，利用納米粒子較大的比表面積或表面鍵和的特異性官能團(tuán)對(duì)樣品中目標(biāo)物進(jìn)行萃取，通過外加磁場(chǎng)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)物和樣品溶液的分離。該方法實(shí)驗(yàn)萃取效率高、操作簡(jiǎn)便，無需樣品離心的步驟，節(jié)省了實(shí)驗(yàn)用時(shí)，且有機(jī)溶劑的使用量少，減少了有機(jī)試劑環(huán)境污染及對(duì)實(shí)驗(yàn)操作人員的毒害。
　　 凝固-漂浮有機(jī)液滴液相微萃取法(SFODLPME)是一種由傳統(tǒng)的液相微萃取(LPME)發(fā)展而來的樣品前處理方法，具有

3、萃取效率高、操作簡(jiǎn)單、成本較低和環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)。傳統(tǒng)的LPME法只能選擇密度比水大且對(duì)被萃取物有良好親和性的有機(jī)溶劑為萃取劑，而SFODLPME法選擇密度比水小、凝固點(diǎn)與室溫接近的有機(jī)溶劑如1-十二醇等為萃取劑，擴(kuò)大了傳統(tǒng)LPME對(duì)萃取劑的選擇。
　　 本課題采用了這兩種新型的樣品前處理技術(shù)并將其與高效液相色譜聯(lián)用，對(duì)人體體液中的己醛和庚醛含量進(jìn)行檢測(cè)。
　　 主要研究?jī)?nèi)容有：
　　 1、采用磁性固相萃取和高效液

4、相色譜聯(lián)用的方法，對(duì)人體尿樣中的己醛和庚醛的含量進(jìn)行測(cè)定。首先讓目標(biāo)物進(jìn)行衍生化反應(yīng)，以2，4-二硝基苯肼為衍生化試劑，甲酸為反應(yīng)催化劑，而后以amine-Fe3O4磁性納米粒子為吸附劑，成功分離萃取了醛類物質(zhì)的衍生化產(chǎn)物。優(yōu)化了一系列衍生化反應(yīng)及萃取的條件，并將其應(yīng)用于人體尿樣的分析檢測(cè)。
　　 2、采用磁性固相萃取和高效液相色譜聯(lián)用的方法，對(duì)人體尿樣中的己醛和庚醛的含量進(jìn)行測(cè)定。以C8-amine-Fe3O4磁性納米粒子為吸

5、附劑，對(duì)吸附劑的用量、衍生化試劑的用量、催化劑的用量、衍生化反應(yīng)時(shí)間及溫度、鹽效應(yīng)等條件進(jìn)行了優(yōu)化，并將其應(yīng)用于實(shí)際尿樣的分析檢測(cè)。
　　 3、采用凝固-漂浮有機(jī)液滴液相微萃取和高效液相色譜聯(lián)用的方法，對(duì)人體血樣中己醛和庚醛的含量進(jìn)行測(cè)定。實(shí)驗(yàn)選用1-十二醇為萃取劑，對(duì)衍生化產(chǎn)物腙進(jìn)行萃取。萃取完成后，將樣品溶液置于低溫環(huán)境中，1-十二醇迅速凝固，復(fù)溶后取樣進(jìn)行色譜分析。優(yōu)化了一系列衍生化反應(yīng)條件及萃取條件，并將其應(yīng)用于實(shí)際血樣